生物化学与分子生物学实验选题过程

选题的步骤一般包括：原始想法或问题的提出，查阅相关文献和批判性的文献综述，形成假说，选题的陈述四个过程。获得文献综述的一个好方法是阅读与主题有关、内容丰富的教科书、专著和杂志。陈述的水平反映研究者的科学思维、理论认识、实践能力和工作的科学性、可靠性及预期结果的可信程度。一个好的选题陈述，可以说是没有实验的论文雏形，这一程序是科研选题过程必不可少的，而且相当重要，也是评价科研课题价值的重要内容之一。

理论教育 2023-11-18

糖的化学性质及单糖的反应反应

（一）单糖的化学性质在单糖分子的开链式结构中，羰基和羟基的共存表现在化学性质上，单糖分别有羰基和羟基的反应。醛糖在浓度较高时或长时间煮沸，才产生微弱的阳性反应。糖原是人与动物体内储存的一种多糖，又称为动物淀粉。

理论教育 2023-11-18

猪脑脂质的提取与分离鉴定-生化实验

本实验采用Blign和Dyer方法，提取猪脑脂质，快速有效。各种规格的薄层预制板及专门仪器已趋向商品化。本实验是用硅胶H为支持剂，用薄层层析技术分离鉴定脑组织所含的脂质。升高烘箱温度，使薄层充分干燥，此过程称为活化。图4-2脂质薄层层析示意图1—磷脂；2—鞘磷脂；3—丝氨酸磷脂；4—脑磷脂；5—物质性质不明确；6—中性脂质。

理论教育 2023-11-18

蛋白质变性：次级键与二硫键的破坏

变性蛋白质只有空间构象的破坏，一般认为蛋白质变性的本质是次级键和二硫键的破坏，并不涉及一级结构的变化。反之，注意防止蛋白质变性就能有效地保存蛋白质制剂。天然蛋白质变性后，所得的变性蛋白质分子互相凝聚或互相穿插结合在一起的现象称为蛋白质凝固。蛋白质的变性并不一定发生沉淀，凝固的蛋白质必定发生变性并出现沉淀，而沉淀的蛋白质不一定发生凝固。

理论教育 2023-11-18

血清总胆固醇测定实验成果

掌握磷硫铁法测定胆固醇的原理及方法。了解测定血清总胆固醇的临床意义。血清中的总胆固醇包括游离胆固醇和胆固醇酯。胆固醇广泛分布于全身各组织，血浆中的胆固醇多为胆固醇酯。低胆固醇血症见于严重贫血、甲状腺功能亢进、营养不良。血清经无水乙醇处理，血清中蛋白质被沉淀，胆固醇等则溶于无水乙醇中。讨论高胆固醇临床检测的意义，以及日常生活中高胆固醇血症的预防措施。

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电泳装置的基本结构-生物化学与分子生物学实验

电泳仪实际是一套电泳装置，主要包括电泳仪和电泳槽两个部分。（一）电泳仪电泳仪是电泳装置的电源，它是提供直流电源的装置，能控制电压和电流的输出，驱动带电物质的迁移。电泳仪基本元件包括电路系统、显示系统和控制系统。（二）电泳槽电泳槽是电泳装置的关键部件，它是凝胶分离样品的工作场所，用于生化分析研究中对电荷粒子进行分离、提纯或制备。毛细管柱是毛细管电泳装置最关键的部件。

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血清丙氨酸氨基转移酶活性测定实验

掌握谷丙转氨酶作用原理，酶活力的定义和测定方法。催化转氨基反应的酶称为转氨酶。正常人血清中此酶活性很低。因此测定血清ALT活性对于某些疾病的诊断具有重要的参考价值。国家卫健委临检中心建议国内无条件使用连续监测法的单位使用赖氏法。表5-2血清丙氨酸氨基转移酶活性的测定混匀，室温放置10 min，在波长505 nm处以蒸馏水调零，读取各管吸光度值。1 mL血清能使A值下降0.001的转氨酶活性为1个卡门氏单位。

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影响电泳分离的因素以及生物化学与分子生物学实验的结论

影响电泳分离的因素很多，下面简单讨论一些主要的影响因素。但增大电场强度会引起通过介质的电流强度增大，而造成电泳过程产生的热量增大。由于中间部位的电泳速度比边缘快，所以电泳分离带通常呈弓形。降低电流强度，可以有效减少产热，但会延长电泳时间，这样会增加待分离大分子的扩散程度从而影响分离效果。在电泳的过程中，需要选择适当的电场强度，同时应配备冷却装置降低温度以达到较好的分离效果。

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蛋白质组数据处理：实验成果！

PMF检索鉴定蛋白质是依据实验中获得的蛋白质的多个肽段质量数据与同一蛋白质肽段质量理论计算值之间的相关性比较。因此，这一技术不适用于检索EST翻译序列，也不适用于鉴定蛋白质的混合物。如果认为蛋白质可能为新的蛋白质，选择NCBI数据库，标准搜索选择Swiss Prot 数据为好。

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离心机的基本类型及分类规定

离心机的用途广泛，机型种类繁多，各生产厂家的离心机都有自己的特色。因此，目前对离心机还没有一个严格的分类标准或规定，通常可按用途、转速进行分类。（二）按转速分离心机按机器额定的最高转速高低可分为低速离心机、高速离心机和超速离心机三种类型。

理论教育 2023-11-18

分光光度计的使用及其操作方法

分光光度计的使用（一）721型分光光度计波长范围为360～1 800 nm，在410～700 nm时灵敏度较好。图2-2721型分光光度计721型分光光度计的操作方法如下：仪器未接通电源时，电表指针必须位于刻度“0”上，否则可用电表上的校正螺丝进行调节。（二）722型分光光度计近年来，我国在721型基础上新生产的722型分光光度计，其特点是用液晶板直接显示透光度和吸光度，用光栅作单色器，使用方便，稳定性提高，如图2-3所示。

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基因组DNA提取实验：快速方法

掌握基因组DNA提取的原理和实验操作细节，掌握酚氯仿抽提法提取外周血DNA的原理和实验操作细节。了解试剂盒提取质粒DNA方法和原理，离心机的分类及其他提取方法。因此，利用这一性质可将生物组织中的DNP与RNP分离，并从样品中抽提出来。向获得的DNA上清液中加入乙醇，即可将纤维状DNA沉淀析出。此步为猪肝基因组DNA提取的最后一步。此步为下次的DNA含量测定做准备。

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脂肪酸β-氧化实验结果

掌握测定β-氧化作用的方法及其原理。了解脂肪酸的β-氧化作用。脂肪酸的β-氧化操作1. 实验材料鲜猪肝。称取肝组织5 g置研钵中，加少量的0.9%氯化钠研成细浆。酮体的测定：吸取两种滤液各2 mL分别放入另2个锥形瓶中，再加3 mL 0.1 mol/L碘液和3 mL 10%氢氧化钠液。为什么说脂肪酸β-氧化实验的关键是制备新鲜的肝糜?

理论教育 2023-11-18

分光光度技术在生物化学与分子生物学实验中的应用

（一）测定溶液中物质的含量可见或紫外分光光度法都可用于测定溶液中物质的含量。也可以先测出不同浓度的标准液的吸光度，绘制标准曲线，在选定的浓度范围内标准曲线应该是一条直线，然后测定出未知液的吸光度，即可从标准曲线上查到其相对应的浓度。（二）用紫外光谱鉴定化合物使用分光光度计可以绘制吸收光谱曲线。紫外线吸收是由不饱和的结构造成的，含有双键的化合物表现出吸收峰。

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电泳缓冲液配制方法及温度存储要求

目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1∶10稀释的储存液作为使用液。Tris-甘氨酸缓冲液用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。电泳缓冲液该溶液的pH不需调整，可直接在大试剂瓶中配制溶液，室温保存。琼脂糖封胶液可在锥形瓶配制，微波炉加热熔化。

理论教育 2023-11-18

玻片制备方法及注意事项

目前较为常用的支持材料是玻片，因为玻片适合多种合成方法，而且在制备芯片前对玻片的预处理也相对简单易行。一定要使用玻片架，架子要放在低速离心机中，到此步结束时它们要被旋转干燥。用50 g NaOH溶解于200 mL ddH2O，再加300 mL 95%的乙醇制备500 mL碱性洗液，把玻片完全浸没在洗液中至少2 h，洗完用ddH2O全面冲洗5次，摇5 min冲洗。保持玻片浸没在ddH2O中，一旦洗净玻片，它们暴露于空气中的时间越短越好，因为灰尘会影响修饰和点片的过程。

理论教育 2023-11-18