图5-4马铃薯块茎—示淀粉粒形态
按上述方法制备莲菜淀粉粒的装片,观察。
(2)取少许浙贝粉末,置于载玻片上,用稀甘油试液1小滴,并用解剖针轻轻将粉末与稀甘油充分搅匀,然后放上盖片观察。
按上述方法取半夏粉末装片,观察。
比较几种材料淀粉粒,注意彼此间淀粉粒的大小、形状、层纹、脐点有何不同,找出各自淀粉粒的特征。
(二)菊糖
菊糖是淀粉的异构体,可溶于水,在细胞液中处于溶解状态,不溶于乙醇,遇乙醇后转变成球状或半球状结晶体。观察时宜用70%乙醇或水合氯醛试液冷处理材料后,方可析出菊糖结晶。加10%α-萘酚乙醇溶液,再加硫酸,显紫红色并很快溶解。
菊糖表面观犹如扇形,常具有放射状纹理,可在相邻的细胞同时出现。菊糖多存在于菊科和桔梗科植物细胞中。
取桔梗或大丽菊根(或其他菊科舌状花亚科植物的根),用乙醇浸泡一星期后,将其切成小块,在木质部以外的部分做纵向徒手切片,再加乙醇1滴,盖片,迅速在镜下观察。在有些薄壁细胞内,靠近细胞壁分布一些扁形或圆球形晶体即为菊糖。
若将上面制片加水1滴,并稍微加热,注意观察菊糖有何变化。
用上述方法另做一切片,直接滴加α-萘酚试剂1小滴,过1~2 min后再滴加80%硫酸1滴,放好盖玻片,立即置于镜下检查,可见菊糖边溶解边染上紫红色。
(三)糊粉粒
植物细胞中的储藏蛋白质多以糊粉粒的形式存在于液泡、细胞质等之中。加碘试液,显棕色或黄棕色;加硝酸汞试液,显砖红色。材料中若含有多量脂肪油,宜先用乙醚或石油醚脱脂后进行试验。糊粉粒的观察多选用种子作为实验材料。
取蓖麻种子,剥去种皮,做胚乳的徒手切片,放于载玻片上滴加乙醚1~2滴,稍等片刻,略使载玻片倾斜将细胞内的脂类随乙醚流失,再加50%乙醇稀释,用10%的碘甘油试液1滴装片观察。在高倍镜下,糊粉粒常为由一个多边形的蛋白质晶体和一个由磷酸盐组成的球晶体以及无定形的蛋白质基质所组成,经染色后蛋白质晶体呈暗黄色,基质染成黄色,球晶体不被染色。
(四)脂肪油、挥发油或树脂
脂肪油、挥发油或树脂加苏丹Ⅲ试液,显橘红色、红色或紫红色;加90%乙醇,脂肪油不溶解(蓖麻油和巴豆油例外),挥发油则溶解。
脂肪油广泛存在于植物各器官中,但种子的细胞中含量最多。
取蓖麻种子胚乳切片或碎末放于载玻片上,加苏丹Ⅲ试液1~2滴,在酒精灯上微微加热放凉后,加盖玻片,在显微镜下可观察到油脂被染成橘红色。
(五)晶体
晶体常被认为是细胞生活中所产生的废物,但对药材品种的鉴定特别是药材粉末鉴定具有十分重要的意义。
1.草酸钙晶体
加稀醋酸不溶解,加稀盐酸溶解而无气泡发生。加硫酸溶液逐渐溶解,片刻后,析出针状硫酸钙结晶。
(1)簇晶:取大黄粉末,做水合氯醛透化装片观察,可见大黄簇晶较大,形如大丽菊花,呈铅灰色,极易鉴别。(www.daowen.com)
(2)针晶:取半夏粉末,做水合氯醛透化装片观察,可见针晶多呈散在状况,也可见到较大的类圆形黏液细胞中含有排列整齐的针晶束。
(3)柱晶:取射干粉末,做水合氯醛透化装片观察,可见棱角分明的长柱形晶体,晶体略呈透明状。
(4)砂晶:取地骨皮粉末少许,按上述方法制片,在显微镜下观察砂晶的形态特征。砂晶是最难鉴定的一种晶体,在植物组织中存在于某些薄壁细胞中。因砂晶是一种很少的晶体,难以和药材粉末区分,观察时应注意几点:①砂晶虽然很少,但大小非常均匀;②其形状大多为小的三角形颗粒,立体感较强;③在调节细调焦螺旋时砂晶常有忽明忽暗的现象,或略比其他粉末光亮。在观察时一定要细心体会才会掌握鉴别砂晶的要领。另外,也可直接取地骨皮制成徒手切片,镜检可见某些细胞中含有砂晶,将其与粉末比较,观察使其特征更易掌握。
(5)方晶:取黄檗粉末,做水合氯醛透化装片观察,可见一些类似方菱形、不规则方形或斜方形等晶体存在,并常成行排列于纤维束旁边的薄壁细胞中,每一薄壁细胞中常具1枚。这种由一束纤维外侧包围着许多含有草酸钙方晶的薄壁细胞所组成的复合体,又被叫作晶鞘纤维。
取大葱的干膜质鳞叶做整体透化装片观察,可见到细胞中单个方形晶体或十字形的复合晶体。
2.碳酸钙晶体(钟乳体)
碳酸钙晶体多存在于植物叶的表皮细胞中,一端与细胞壁连接,形如一串悬挂的葡萄,故叫钟乳体。将3~4小块印度橡胶树叶片摞在一起,做徒手切片,选取较薄切片放到载玻片上,滴加稀甘油,盖片观察,可见到钟乳体的纵切面观。
也可用穿心莲叶,经水合氯醛透化后用稀甘油封片,观察钟乳体正面观形态。
3.草酸钙晶体与碳酸钙晶体的鉴别反应
(1)取大黄粉末制片2张,分别滴加6%醋酸和20%硫酸试液,显微镜下观察看有什么变化发生。
(2)取大麻叶制片2张,分别滴加6%醋酸和20%硫酸试液,观察其所发生变化,并详细记述之。
(六)特化的植物细胞壁
1.纤维素细胞壁
植物细胞初生壁主要是由纤维素、半纤维素、果胶质等物质构成,为薄壁细胞或韧皮部输导组织的细胞壁。加氯化锌碘试液,或先加碘试液湿润后,稍放置,再加66.5%硫酸试液,细胞壁染成紫色,细胞质染成淡黄色,细胞核染成棕色。
取马铃薯块茎,做横切片,经水合氯醛透化后,再滴加氯化锌碘液1滴,染色,用稀甘油封片,观察。可见到纤维素细胞壁被染成蓝紫色或蓝色,还可用碘-碘化钾和66.5%硫酸试液染色后观察。
2.角质化细胞壁
角质化的细胞壁是指细胞产生的一些脂肪性物质不但填充到细胞壁内,又常在植物某些器官的表皮外侧形成一层角质,又叫角质层。角质层的薄厚往往与植物种类及生态环境有关,实验中所观察到最明显的部分主要是角质层。
取夹竹桃叶片做横切片,置于载玻片上,滴加苏丹Ⅲ试液1滴,在酒精灯上加热,稍放片刻,加稀甘油1滴,封片观察,可清楚地看到叶的上下表皮外侧有一条紧紧与表皮细胞连到一起的橙红色亮带,这便是角质层。
3.木质化细胞壁
木质化细胞壁主要是由木质素沉积于细胞壁上面所形成,多为次生壁。具木质化细胞壁的成熟细胞多为死细胞,多为厚壁组织,如石细胞或纤维,木质部的输导组织如导管或管胞,有的射线细胞或输导组织以外的细胞也木化。加间苯三酚试液1~2滴,稍置,再滴加浓盐酸1滴,因木化程度不同,显红色或紫红色,有时需稍加热,颜色才能显现。这些类型的细胞由于壁较为坚硬,不易破坏,又因为各种细胞具有不同的形态特征,往往是各类粉末药材的重要鉴定依据。
取梨果核周围果肉中沙粒状颗粒少许于载玻片上,并用解剖针将其轻轻捣碎,滴加间苯三酚和浓盐酸各1滴,封片后镜检,可见许多具有极厚木质化细胞壁的细胞成团或散在,均被染成樱红色或紫红色。见图5-5。
也可取薄荷茎做徒手横切片:加碘-碘化钾试剂1滴,再加66.5%硫酸1滴,然后封片观察。可见到被染成棕黄色的部分便是木质化细胞壁,另外也可看到四个角处一些染成蓝色或蓝紫色的部分,为纤维素细胞壁。
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