一、目的要求

1．掌握临时制片的撕取表皮法和徒手切片法。

2．掌握植物细胞的基本构造。

3．了解细胞壁的特化及鉴别方法，了解胞间连丝和纹孔的形态构造。

二、实验原理

植物细胞是构成植物体的形态构造和生命活动的基本单位，形态多种多样，大小差异很大，一般细胞直径为10～100μm，光学显微镜的分辨力不小于0．2μm，有效放大倍数一般不超过1 200倍。植物细胞的显微结构可借助普通光学显微镜来观察。

三、实验用品

仪器:光学显微镜、镊子、解剖针、刀片、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸、酒精灯。材料:

(1)新鲜材料:洋葱鳞茎。

(2)永久制片:柿胚乳永久制片。

试剂:碘－碘化钾试液、甘油、蒸馏水、乙醚和无水乙醇(二溶剂体积比为7∶3)。

四、实验内容

(一)洋葱表皮细胞的制片与观察

1．制片

取洋葱鳞茎，用刀片在其表皮轻轻划开几个边长约为0．5 cm的小三角形，然后用镊子夹住一角，轻轻撕取，选取最薄的一块，迅速放在滴有蒸馏水的载玻片上。要使表皮平展，如有重叠或被折，可用解剖针将其展平，然后再用盖玻片封片。如果盖片不严，会产生气泡，影响观察。气泡在显微镜底下常呈圆形，周围一圈黑色，如图5－1所示，或者与组织结构的空隙形状一致。

2．观察洋葱鳞叶表皮细胞的基本结构

将制好的洋葱表皮装片置于显微镜下进行观察，如图5－2所示，可见以下几部分:(www.daowen.com)

图5－1“e”字及气泡在显微镜下的形态

图5－2光镜下的洋葱表皮细胞基本结构

(1)细胞壁。洋葱表皮细胞的细胞壁几乎为无色透明的，在显微镜下观察，仅能看到每一个细胞的四壁组成的轮廓，而上下两层细胞壁看不到，所看到的细胞壁实际是由两相邻细胞共同组成，它包括两相邻细胞的两层初生壁，以及两相邻细胞所具有的胞间层，故所见细胞壁为三层结构。

(2)细胞质。在成熟的细胞中细胞质为紧贴细胞壁的薄薄一层，可见到细胞核位于其中，并可看到许多细小颗粒。

(3)细胞核。为半透明状圆形的小物体，因其有较强的折光，比细胞质容易看见，在细胞核内，还可明显地看到多个颗粒状核仁。

(4)液泡。在未成熟细胞中常见到的数个小液泡，在细胞内分散存在。在成熟的细胞中，液泡常占据中央的绝大部分，它将细胞质、细胞核等挤向紧贴细胞壁处。

3．碘－碘化钾试液染色观察

用碘－碘化钾试液代替蒸馏水，直接装片，或在已经用蒸馏水制好的装片进行，将碘－碘化钾试剂滴在盖玻片的一侧，在盖玻片的另一侧用吸水纸将水吸出，不断使其试液流入盖玻片下，使细胞染色，经染色后细胞核染色较深，细胞质染色较浅，液泡不被染色，可使细胞内的结构更为清晰。

(二)柿胚乳胞间连丝的观察

观察柿胚乳的永久制片，可见在两个细胞的细胞壁之间有明显的丝状物，即为胞间连丝。如图5－3所示。

五、思考题

1．绘3～4个洋葱表皮细胞并注明各部分名称。

2．绘柿胚乳胞间连丝示意图。