Boxus（1974）最早开展樱花组织培养，1977年对日本樱花进行了离体培养研究，均获得了丛芽（贺爱利等，2010）。国内自王永清最先报道了樱花组织培养芽外植体建立以来，有关观赏樱花组织培养快速繁殖获得再生植株的报道逐渐增多（邹娜等，2007）。

1） 外植体的选择

樱属再生研究中，已经利用的外植体种类有带芽茎段（周志坚等，1994；及华，1998；王光萍等，2002；王守印等，2003；姚连芳等，2004；周丽华等，2004；吕月良等，2006；王贤荣等，2008；荣冬青等，2008a；李艳敏等，2008；何月秋，2010；南程慧等，2010；陈志伟，2011）、芽心（王永清等，1997；黄宇翔等，2006）、种子（闫道良等，2006；南程慧等，2010）、叶片（黄守印等，2002a；王贤荣等，2008）、叶柄（黄守印等，2002a；王贤荣等，2008）、花梗（王文房等，2006）、花托、子房、苞片（和凤美等，2010）及无菌系茎段（孟月娥等，2006）。带芽茎段是目前使用最多的离体快繁外植体，其中以幼嫩的茎尖为佳（见图4）；种胚外植体具有不受季节限制、污染率低等优点，亦为外植体的首选（见图5）。

2） 外植体的灭菌

吕月良等（2006）、王贤荣等（2008）、荣冬青等（2008a）、南程慧等（2010）、陈志伟等（2011）将采回的外植体先在流水下冲洗0.5～2 h，后用70%的乙醇浸泡30 s，无菌水冲洗干净，接着用0.1%的升汞浸泡3～15 min（不同樱花种类处理时间有所区别），无菌水反复冲洗，灭菌效果较理想。黄守印等（2003）、周丽华等（2004）李艳敏等（2008）、荣冬青等（2008b）研究了不同灭菌处理对带芽茎段灭菌效果的影响。

黄守印等（2002）采用1.0%次氯酸对叶片和叶柄进行灭菌。王文房等（2006）、王贤荣等（2008）和凤美等（2010）也都进行了叶片与叶柄灭菌相关实验。闫道良（2005）还对种子作为外植体的灭菌方法进行了实验。

3） 培养基

在已知的10种（包括变种及栽培种）观赏类樱花的组织培养研究中，芽诱导、愈伤组织诱导以及不定芽增殖培养多以MS和经改良过的MS为基本培养基，而生根培养时则以1/2MS或3/4MS培养基为主，全价的MS及1/4MS培养基的生根效果差（闫道良等，2006；邹娜等，2008；陈志伟等，2011；南程慧，2012）。研究者也尝试使用其他的基本培养基，如周丽华等（2004）对绯寒樱的芽增殖培养研究，孟月娥等（2006）比较了MS培养基和ML培养基对日本晚樱试管苗增殖与生根的影响。王永清等（1997）研究发现，启动培养基的MS对樱花芽外植体褐化死亡及水浸状的发生有很大影响。王光萍等（2002）、吕月良等（2006）和黄宇翔等（2006）发现，钟花樱不定芽初代诱导时，改接于1/4MS培养基上后外植体则生长良好。

图4　茎尖培养A，茎尖；B，茎尖培养25 d

图5　种胚培养A，种子；B，MS＋GA3100 mg/L中黑暗培养20 d时幼苗

4） 生长调节剂

目前，樱属植物使用最多的细胞分裂素和生长素分别为6-BA和NAA、IBA。邹娜等（2007）认为BA浓度在一定范围，配合不同浓度的NAA或IBA，对不定芽的诱导分化效果比较好。和凤美等（2010）对冬樱花花梗愈伤组织分化，王文房等（2006）在对樱花花柄形成愈伤组织都进行了不同的搭配实验；黄守印等（2002a）对雾灵樱花叶片、叶柄诱导愈伤组织分化试验中发现，当细胞分裂素2.0 mg·L-1时，100%的外植体产生愈伤组织。作者在对迎春樱的组培中发现，6—BA具有促进丛芽产生的作用，浓度过高则促进愈伤组织的产生；在丛芽诱导与增殖试验中，可采取前期高浓度6-BA 刺激诱导丛芽，后期低浓度增殖生长的方法，进行迎春樱的丛芽诱导与增殖（见图6）。

图6　丛芽诱导及壮苗增殖A，愈伤苗；B，丛芽

樱花生根诱导所用的生长素多以IBA和NAA为主。黄守印等（2002）与周丽华等（2004）认为，单种生长素IBA诱导生根的效果要明显优于NAA及两种生长素配合。王贤荣等（2008）、荣冬青等（2008）及何月秋等（2010）的研究则认为，使用IBA＋NAA组合促进钟花樱或日本樱花试管苗生根效果较好。王光萍等（2002）与闫道良等（2006）发现，使用IBA＋NAA组合附加低浓度的细胞分裂素BA，对钟花樱根的诱导率有明显提高；吕月良（2006）的研究结果与王光萍等相反，认为IBA＋NAA＋BA的组合配比生根效果显著不如IBA＋NAA的组合好。另外，徐兆波等（2001）、王光萍等（2002）、闫道良等（2006）及吕月良等（2006）在樱花增殖培养中还添加了GA，不仅有利于丛芽增殖，而且可起到壮苗功效。

5） 添加剂

姚连芳等（2001）在培养基中添加NaH2PO4继代培养日本樱花试管苗，表明NaH2PO4处理对日本樱花试管苗的植株生长高度有明显的促进作用。邹娜等（2008），发现活性炭对福建山樱花试管苗生根起抑制作用。

综上所述，樱属植物种子具有休眠特性，需经过激素处理或低温层积处理的方法，解除其休眠，促进种子萌发。生产上可采用低温层积处理后选播的方法，进行穴盘育苗，也可于秋季播种，利用3～5℃恒温层积＋冬季自然低温变温层积播种的方法，进行大田育苗，3～5℃恒温层积时间的长短可依据不同种类的差异进行调整，但时间不宜过长。低温层积果核选播法穴盘育苗与冬季随播法高床田间育苗相比，穴盘育苗具有种子利用率高，出苗整齐，不受季节限制，后期容易移栽等优点，但此育苗方法需要大型温室辅助进行；田间高床育苗则具有简单易行，相同生长时间内生长量大，培育成本极低等优点，但存在出苗率低，受季节限制等缺点。因此，可根据培育条件的差异，选择合适的方法进行育种。

在嫁接繁殖时，应根据不同的培育目的，选择合适的嫁接方法，培育垂枝类樱花只能采用枝接的方法。同时，注重砧木的选择，宜选择生长健壮、寿命较长、无不良病害，且与接穗亲和性较好的材料作为砧木，选择合适的嫁接时期。

食用樱桃的规模化生产目前以扦插为主，而观花类樱花则多以嫁接方式。一方面可能在于多数观花类樱花的难生根性；另一面可能在于观花类樱花扦插生根的方法有待深入研究。因此，在樱花扦插时，应注重扦插季节，选择合适的促生根激素及其配比。在扦插方法上，除采用固体基质扦插外，可同时研究水培方法，探讨樱花扦插生根的类型及机理，注重皮孔生根类型的机理及过程，完善樱花类植物的生长发育过程。

组织培养目前在樱花的规模化生产中并不占优势，很少有企业采用此方法进行快速繁殖，一方面在于种子繁殖、嫁接繁殖、扦插繁殖已可满足市场的需求；另一方面也在于组织培养的成本较高，组培方法尚待完善，国产樱花中仅有少数品种进行了组培快繁方面的研究，且组培方法尚不完善，难以规模化推广。因此，应加强国产樱花的研发力度，进一步完善组培方法，降低成本，最终达到规模化生长和推广的目的。

参考文献

［ 1 ］ Ching Te Chien， Shun Ying Chen， Jeng Chuan Yang. Effect of stratifi cation and drying on the germination and storage of Prunus campanulata seeds [J]. Taiwan Journal Forest Science， 2002，17（4）:413-420.

［ 2 ］ Li C-L， Bartholomew B. Cerasus. In: Wu Z-Y， Raven P H eds. Flora of China [M]. Beijing: Science Press; St. Louis: Missouri Botanical Garden Press. 2003，9:404-420.

［ 3 ］ Shun Ying Chen， Ching Te Chien， Jeng Der Chuang. Dormancy-break and germination in seeds of Prunus campanulate （Rosaceae）: role of covering layers and changes in concentration of abscisicacid and gibberellins [J]. Seed Ccience Research， 2007（17）:21-32.

［ 4 ］ 陈璋.台湾优良观赏花木八重绯寒樱嫁接繁育试验研究[J].福建林业科技，2007a，34（4）: 27-30.

［ 5 ］ 陈志伟，王贤荣.微毛樱离体快繁初步研究[J].福建林学院学报，2011，31（4）:49-353.

［ 6 ］ 陈志伟.黄山微毛樱居群数量特征及离体快繁研究[D].南京林业大学，2011.

［ 7 ］ 戴国望.樱花嫩枝扦插育苗试验初报[J].湖北林业科技，1989，（2）:36-37.

［ 8 ］ 段晓梅.冬樱花居群生态、现代区系地理及繁殖研究[D].西南林学院，2003.

［ 9 ］ 段晓梅.冬樱花扦插繁殖研究[J].西南林学院学报，2003，23（1）:43-45.

［10］ 段晓梅.樱花繁殖综述[J].思茅师范高等专科学校学报，2002，18（3）:82-85.

［11］ 方妙辉.福建山樱花扦插育苗试验[J].福建农业科技，2006，（4）:40-41.

［12］ 方妙辉.钟花樱桃种子冷处理及生根剂浸种试验[J].福建果树，2006，（3）:52-53.

［13］ 何月秋，王志龙，池树友.日本樱花茎段再生体系的建立[J].四川林业科技，2010，31（4）: 64-67.

［14］ 贺爱利，刘艳杰，黄海帆，等.樱花组织培养研究进展[J].河南农业，2010，7:53-54.

［15］ 黄守印，池井存，苏淑欣，等.雾灵山地区野生樱花的组织培养与快速繁殖[J].植物生理学通讯，2003，39（3）:228.

［16］ 黄守印，池井存，苏淑欣，等.雾灵山野生樱花试管苗生根的初步研究[J].承德民族职业技术学院学报，2002b，（3）:56-57.

［17］ 黄守印，池井存，苏淑欣，等.雾灵樱花体细胞愈伤组织诱导与分化的研究[J].承德民族职业技术学院学报，2002a，（1）:52-54.(www.daowen.com)

［18］ 黄宇翔，刘金燕，卓小丽，等.福建山樱花组培快繁研究[J].中国农学通报，2006，22（8）: 162-164.

［19］ 及华.樱花的离体快速繁殖[J].植物生理学通讯，1998，34（4）:26.

［20］ 康木水.福建山樱花种子发育观察与育苗技术研究[J].福建林业科技，2007，34（3）:19-22.

［21］ 李艳敏，孟月娥，赵秀山，等.‘红叶樱花’的组织培养和快速繁殖[J].植物生理学通讯，2008，44（6）:1163-1164.

［22］ 刘金郎.重瓣樱花硬枝扦插育苗技术[J].林业实用技术，2007，（3）:40.

［23］ 陆贵巧，林青，贾旭光，等.樱花嫩枝扦插生根试验[J].经济林研究，1998，16（3）:35-36.

［24］ 吕月良，陈璋，施季森，等.福建山樱花不定芽诱导和植株再生规模化繁殖试验[J]. 南京林业大学学报（自然科学版），2006，30（3）:105-108.

［25］ 吕月良，陈璋，施季森，等.福建山樱花扦插繁殖及其影响因子研究[J].福建林业科技，2006，33（2）:1-6.

［26］ 吕月良，陈璋，施季森.福建山樱花研究现状[J].南京林业大学学报，2006:1-39.

［27］ 孟月娥，李艳敏，赵秀山，等.日本晚樱组培快繁技术研究[J].中国农学通报，2006，22（10）: 264-266.

［28］ 南程慧，王贤荣，汤庚国，等.迎春樱组培无菌外植体获得方法初探[J].湖北民族学院学报（自然科学版），2010，28（3）:251-255.

［29］ 南程慧.迎春樱居群变异与分枝生物学研究[D].南京林业大学，2012.

［30］ 荣冬青，樊英鑫，王贤荣.野生早樱嫩枝扦插繁殖技术的研究[J].河北北方学院学报（自然科学版），2009，25（4）:33-38.

［31］ 荣冬青，王贤荣.垂枝早樱‘红枝垂’组培快繁试验[J].林业科技开发，2008，22（5）:72-75.

［32］ 荣冬青.野生早樱组织培养及扦插繁殖技术研究[D].南京林业大学，2008.

［33］ 孙敦琴.嫁接樱花技巧[J].中国花卉盆景，1995，（2）:13.

［34］ 汪雪文.嫁接培育日本樱花大苗技术[J].安徽林业科技，2006，（3）:29-30.

［35］ 王光萍，黄敏仁.福建山樱花的组织培养及植株再生[J].南京林业大学学报（自然科学版），2002，26（2）:73-75.

［36］ 王文房.李修岭.樱花花柄的组织培养[J].安徽农业科学，2006，34（22）:5839-5841.

［37］ 王贤荣，荣冬青.钟花樱组织培养中多因子正交试验研究[J].安徽农业大学学报，2008，35（2）: 169-173.

［38］ 王贤荣.国产樱属分类学研究[D].南京林业大学，1997.

［39］ 王小蓉，熊庆娥，曾伟光. mIBA、树龄、枝段对日本晚樱绿枝扦插生根的影响[J].四川农业大学学报，2000，18（3）:246-248.

［40］ 王小蓉，曾伟光，熊庆饿.IBA促进日本晚樱绿枝扦插生根机制研究[J].西南农业大学学报（自然科学版），2004，26（5）:597-600.

［41］ 王艳华，高述民，李凤兰，等.大山樱种子休眠机理的探讨[J].种子，2005，（24）5:12-16.

［42］ 王永清，汤浩茹，邓群仙，等.樱花离体培养芽外植体的建立[J].四川农业大学报，1997，15（3）: 341-344.

［43］ 王振师，周丽华，曾雷.绯寒樱的扦插繁殖[J].中南林学院学报，2005，25（3）:82-84.

［44］ 谢利锁.野生早樱嫩枝扦插繁殖技术研究[J].林业科技开发，2002，16（2）:20-22.

［45］ 徐兆波，陈秀云，郭绍霞，等.垂枝樱花引种观察与繁育技术研究[J].莱阳农学院学报，2001，18（1）:32-36.

［46］ 闫道良，王贤荣，钦佩，等.钟花樱组织培养再生体系的建立[J].林业科技开发，2006，20（3）: 21-24.

［47］ 闫道良.钟花樱居群特征与繁殖技术研究[D].南京林业大学，2005.

［48］ 姚连芳，张建伟，冷天波，等.樱花组培快繁生产技术[J].林业实用技术，2004，（3）:27.

［49］ 姚连芳，张建伟，杨立峰，等.NaH2PO4及NAA对樱花试管苗壮苗培养的影响[J].河南职技师院学报，2001，29（2）:19-20.

［50］ 张国，赵玉，李金.樱花全光雾插试验初报[J].河北林业科技，1999，4:14-15.

［51］ 张艳芳.樱花嫁接繁殖[J].中国花卉园艺，2008，（8）:30-32.

［52］ 张义，王剑峰.赤霉素浸泡与层积时间对山樱种子萌发的影响[J].长江大学学报（自然科学版），005，2（8）:26-27.

［53］ 周丽华，王振师，许冲勇，等.绯寒樱的组织培养快繁研究[J].广东林业科技，2004，20（4）:1-4.

［54］ 周志坚，翟应昌，周丽华，等.大岛樱的组织培养与繁殖[J].广东林业科技，1994，（1）:1-6.

［55］ 朱继军.冬樱花引种及嫁接繁育初报[J].现代园林，2010，（6）:39-41.

［56］ 邹娜，曹光球，林思祖.观赏樱花繁殖技术研究进展[J].西南林学院学报，2007，27（6）:42-46.