(1)按操作说明书使色谱仪正常工作,色谱条件如下。
柱温:室温。
流动相:甲醇∶水=60∶40。
流动相流量:1.0 mL/min。
检测波长:275 nm。
(2)咖啡因标准系列溶液的配制
分别用吸量管吸取0.40 mL、0.60 mL、0.80 mL、1.00 mL、1.20 mL、1.40 mL 咖啡因标准储备液于六只10 mL容量瓶中,用二氯甲烷定容至刻度,浓度分别为40 mg/L、60 mg/L、80 mg/L、100 mg/L、120 mg/L、140 mg/L。
(3)样品处理
①将约100 mL 可口可乐置于250 mL 洁净、干燥的烧杯中,剧烈搅拌30 min 或用超声波脱气5 min,以清除可乐中的二氧化碳。
②准确称取0.25 g咖啡,用超纯水溶解,定量转移至100 mL容量瓶中,定容至刻度,摇匀。(www.daowen.com)
③准确称取0.30 g 茶叶,用30 mL 超纯水煮沸10 min,冷却后,将上层清液转移至100 mL 容量瓶中,并按此步骤再重复两次,最后用蒸馏水定容至刻度。
将上述三份样品溶液分别进行干过滤(即用干漏斗、干滤纸过滤),弃去前过滤液,取后面的过滤液。
分别吸取上述三份样品滤液25.00 mL 于125 mL 分液漏斗中,加入1.0 mL 饱和氯化钠溶液,l mL 1mol/L NaOH 溶液,然后用20 mL 二氯甲烷分三次萃取(l0 mL、5 mL、5 mL)。将二氯甲烷提取液分离后经过装有无水硫酸钠的小漏斗(在小漏斗的颈部放一团脱脂棉,上面铺一层无水硫酸钠)脱水,过滤到25 mL容量瓶中,最后用少量二氯甲烷多次洗涤无水硫酸钠小漏斗,将洗涤液合并至容量瓶中,定容至刻度。
(4)绘制工作曲线
待液相色谱仪基线平直后,分别注入咖啡因标准系列溶液l0 μL,重复两次,要求两次所得的咖啡因色谱峰面积基本一致;否则,继续进样,直至每次进样色谱峰面积重复,记下峰面积和保留时间。
(5)样品测定
分别注入样品溶液10 μL,根据保留时间确定样品中咖啡因色谱峰的位置,再重复两次,记下咖啡因的色谱峰面积。
(6)实验结束后,按要求关好仪器
免责声明:以上内容源自网络,版权归原作者所有,如有侵犯您的原创版权请告知,我们将尽快删除相关内容。