理论教育 常用染料配制步骤-发育生物学实验指导

常用染料配制步骤-发育生物学实验指导

时间:2023-11-21 理论教育 版权反馈
【摘要】:乙液(染色剂):苏木精0.5 g95%乙醇10 mL重蒸馏水90 mL将苏木精先溶于10 ml 95%乙醇中,慢慢倒入重蒸馏水中,瓶口用纱布扎紧置于有光处。约1个月后苏木精被氧化为深琥珀色即可使用。

常用染料配制步骤-发育生物学实验指导

1.苏木精

(1)铁钒苏木精

甲液(媒染剂):

硫酸铁铵(铁钒) 2~4 g

蒸馏水 100 mL

必须保持新鲜,最好临用前配制。

乙液(染色剂):

苏木精 0.5 g

95%乙醇 10 mL

重蒸馏水 90 mL

将苏木精先溶于10 ml 95%乙醇中,慢慢倒入重蒸馏水中,瓶口用纱布扎紧置于有光处。约1个月后苏木精被氧化为深琥珀色即可使用。此时要将瓶盖盖好,可以放置很久。

切片先经甲液媒染,并充分水洗后才能以乙液染色,染色后经水稍洗再用另一瓶甲液分色至适度。

(2)埃里希氏苏木精

苏木精 1 g

纯乙醇或95%乙醇 50 mL

醋酸 5 mL

甘油 50 mL

钾矾(硫酸铝钾) 约5 g(饱和量)

蒸馏水 50 mL

将苏木精溶于约15 mL的纯乙醇中,再加冰醋酸后搅拌,以加速其溶解过程;当苏木精溶解后将甘油倒入并摇动容器,同时加入其余的纯乙醇;加钾矾在研钵中研碎并加热,然后将它溶解于水中;将温热的钾矾溶液一滴一滴地加入上述染色剂中,并随时搅拌;将溶液混合完毕,将瓶口用一层纱布包着小块棉花塞起来,放在暗处通风的地方,经常摇动以促进其成熟,直到颜色变为深红色为止。成熟时间需2~4周。若加入0.2 g碘酸钠,可立即成熟。

(3)德拉菲氏苏木精

甲液:

苏木精 1 g

纯乙醇 6 mL

乙液:

铵矾(硫酸铝铵)饱和水溶液(约1∶11) 100 mL

丙液:

甘油 25 mL

甲醇 25 mL(www.daowen.com)

将甲液一滴一滴地加入乙液中,并随时搅动,然后暴露于阳光和空气中1周到10 d;加入丙液;将混合液静置1~2个月至颜色变深为止(此时可过滤)。成熟后须置于阴冷处塞紧瓶口,可长期保存使用。使用时可将染剂1份用3~5份蒸馏水稀释,则染色后分化更明显。

(4)哈里斯苏木精

甲液:

苏木精 0.5 g

95%乙醇 5 mL

乙液:

钾矾或铵矾 10 g

蒸馏水 100 mL

氧化汞 0.25 g

冰醋酸 几滴

将苏木精先溶于5 mL 95%乙醇中;溶解10 g钾矾或铵矾于100 mL蒸馏水中,并加热煮沸;将两液混合煮沸0.5 min,并加入0.25 g氧化汞;很快在冷水浴锅中冷却;冷却液过夜后用双层滤纸过滤,并加入冰醋酸几滴,以加强核的染色。此染色液可保存1~2个月。

2.希夫试剂

称1 g碱性品红于200 mL煮沸的重蒸馏水中,5 min后使其冷却至55~50℃,过滤到一个棕色的试剂瓶中,加入1 mol/L HCl 20 mL,继续冷却至25℃,加入1 g偏亚硫酸氢钠,摇动瓶子使其溶解。密闭瓶口,置黑暗低温处或冰箱内(4℃左右),18~24 h后检查,试剂如透明无色或呈浅黄色时即可使用,这就是Schiff试剂溶液。如有不同程度的红色未褪,可加入1 g活性炭,强烈震荡1 min,仍在低温下静置过夜,然后用滤纸过滤后使用。密封瓶口,包以黑纸,在5℃以下冰箱内可以保存半年。

3.洋红

(1)醋酸洋红

洋红 1 g

冰醋酸 90 mL

蒸馏水 110 mL

将90 mL冰醋酸加入到110 mL蒸馏水中煮沸,然后将电炉移去立刻加入洋红1 g,使之迅速冷却过滤,并加醋酸铁或氢氧化铁(媒染剂)水溶液数滴,直到颜色变为葡萄酒色,注意不能将铁加太多,否则洋红即会沉淀。

(2)硼砂洋红

4%硼砂水溶液 100 mL

洋红 2~3 g

70%乙醇 100 mL

取2~3 g洋红粉末加到100 mL的4%硼砂水溶液中,煮沸30 min;将此液静置3 d后用等量的70%乙醇冲淡,再静置24 h后过滤。此染色剂适合核的染色及整体标本的染色。

4.1%番红水溶液

番红1 g,苯胺水饱和液100 mL(4 mL苯胺油溶于100 mL蒸馏水)。溶液过滤后使用。

5.0.5%固绿染色液

固绿0.5 g,95%乙醇100 mL。

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