理论教育 常用粘片剂配制技巧-发育生物学实验指导

常用粘片剂配制技巧-发育生物学实验指导

时间:2023-11-21 理论教育 版权反馈
【摘要】:将APEC粘片剂倒入染缸中,将烘干的载玻片置于染缸中30 s,再入纯丙酮或dH2O中漂去未结合的APEC,然后使载玻片在37℃下烘干。适用于不易粘贴的材料。

常用粘片剂配制技巧-发育生物学实验指导

1.铬矾-明胶粘片剂

铬矾(硫酸铬钾)0.5 g,明胶5 g,ddH2O至1000 mL。先在烧杯中加热溶解明胶(温度过高会使明胶烧糊,应边加热边搅拌),再加入铬矾,包被玻片时控制水温在70℃(水浴锅),如有明显残渣,过滤后使用。

2.0.5%多聚赖氨酸(PLL)粘片剂储备液

PLL,25 mg;ddH2O或DEPC水溶液5 mL。充分混合后分装成1 mL,置-20℃保存。此储备液可反复冻融。工作溶液为0.01%。将0.01%的多聚赖氨酸涂于玻片上5 min。在60℃烘箱1 h干燥,或室温18~26℃过夜干燥备用。

3.APEC粘片剂

按APEC∶丙酮=1∶49的比例混合,即为APEC粘片剂。将APEC粘片剂倒入染缸中,将烘干的载玻片置于染缸中30 s,再入纯丙酮或dH2O中漂去未结合的APEC,然后使载玻片在37℃下烘干。

4.郝普特氏明胶粘片剂

明胶 1 g

蒸馏水 100 mL

将明胶溶解于30℃的蒸馏水中,(在水浴锅内进行),再加:

石炭酸结晶 2 g

甘油 15 mL

充分搅拌后过滤使用。

5.韦佛明胶粘片剂

甲溶液:(www.daowen.com)

明胶 1 g

丙酸钙 1 g

1%氯化烃基二甲基代苯甲胺 1 mL

蒸馏水 100 mL

乙溶液:

铬矾(硫酸铬钾) 1 g

蒸馏水 90 mL

40%甲醛 10 mL

用时将混合液(甲液1份,乙液9份)滴在载玻片上,随即将石蜡片加在上面,烫平,倒掉多余的混合液,并用吸水纸将蜡片四周的液体吸去。适用于不易粘贴的材料。

6.梅耶氏蛋白粘片剂

蛋白 50 mL

甘油 50 mL

水杨酸钠或麝香草酚 1 g

将蛋白与蛋黄分开,把水杨酸钠溶解于少量水中,然后加入其他成分,搅拌均匀后过滤使用。

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