理论教育 固定化酶(细胞)活力:食品酶学与酶工程原理

固定化酶(细胞)活力:食品酶学与酶工程原理

时间:2023-11-18 理论教育 版权反馈
【摘要】:固定化酶(细胞)的活力即固定化酶(细胞)催化某一特定化学反应的能力,其大小可用一定条件下它所催化某一反应的反应初速度来表示。固定化酶(细胞)的单位可定义为:每毫克干重固定化酶(细胞)每分钟转化底物的量,表示为μmol/。和游离酶相似,表示固定化酶的活力一般要注明下列测定条件:温度、搅拌速度、固定化酶的干燥条件、固定化的原酶含量或蛋白质含量及用于固定化酶的原酶的比活力。

固定化酶(细胞)活力:食品酶学与酶工程原理

固定化酶(细胞)的活力即固定化酶(细胞)催化某一特定化学反应的能力,其大小可用一定条件下它所催化某一反应的反应初速度来表示。固定化酶(细胞)的单位可定义为:每毫克干重固定化酶(细胞)每分钟转化底物(或生成物)的量,表示为μmol/(min·mg)。如果是酶膜、酶管、酶板,则以单位面积的反应初速度来表示,即μmol/(min·cm2)。和游离酶相似,表示固定化酶的活力一般要注明下列测定条件:温度、搅拌速度、固定化酶的干燥条件、固定化的原酶含量或蛋白质含量及用于固定化酶的原酶的比活力。

固定化酶通常呈颗粒状,所以一般用于测定游离酶活力的方法要做适当改进后才能测定固定化酶,其活力可在两种基本系统——填充床或均匀悬浮在保温介质中进行测定。以测定过程分类,测定方法分为间歇测定和连续测定两种。

1.间歇测定

间歇测定是在搅拌或振荡反应器中,在与游离酶同样的测定条件下(如均匀悬浮于保温介质中)进行,然后间隔一定时间取样,过滤后按常规酶活力测定方法进行测定。此方法较简单,但所测定的反应速度与反应容器的形状、大小及反应液的体积有关。而且,随着振荡和搅拌速度加快,反应速度会提高,达到某一水平后便不再升高。所以要尽可能使反应在最适条件下进行。(www.daowen.com)

2.连续测定

连续测定是将固定化酶装入具有恒温水夹套的柱中,以不同流速流过底物,测定酶柱流出液。根据流速和反应速度之间的关系,算出酶活力(酶的形状可能影响反应速度)。在实际应用中固定化酶不一定在底物饱和条件下反应,故测定条件要尽可能与实际工艺相同,这样才能有利于比较和评价整个工艺。

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