1. 常用电泳缓冲液

续表

说明：

（1）TBE溶液长时间存放后会形成沉淀物，为避免这一问题，可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液，出现沉淀后则予以废弃。

以上都以1×TBE作为使用液（即1∶5稀释浓储液）进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1∶10稀释的储存液作为使用液。

（2）Tris-甘氨酸缓冲液用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

2. 双向电泳常用溶液配制

（1）水化/上样缓冲液。

水化上样缓冲液（Ⅰ）1 mL

水化上样缓冲液（Ⅰ）中的尿素浓度可以调高到9或者9.8 mol/L，用7 mol/L Urea和2 mol/L Thoiurea溶解蛋白的能力较单用尿素强。目前常用的去垢剂为CHAPS，也可用Triton X-100、NP-40等代替。可以加蛋白质酶的抑制剂和核酸酶。还原剂可用DTT或TBP，分离碱性蛋白时最好用TBP。溴酚蓝作为指示剂，可以监测上样和聚焦过程，如操作熟练，可以不加。

溴酚蓝储液

（2）胶条平衡液储存液。

50 mmol/L Tris-cl pH 8.8，6 mol/L Urea，30% glycerol，2% SDS，bromophenol blue，200 mL。

分装后储存于-20 °C；溴酚蓝可以不加；用之前在加DTT（20 mg/mL）或者碘乙酰胺（25 mg/mL）。

（3）10%（V/V）SDS溶液。

SDS（Fw 288.38） 10.0 g

MilliQ H2O 至100 mL

用0.45 μm的滤膜过滤室温保存（高纯试剂一般不用过滤）。

（4）聚丙烯酰胺单体储存液。

用0.45μm的滤膜过滤（可不过滤），4 °C避光保存。

（5）4×分离胶溶液（4×Resolving gel buffer，1.5mol/L Tris-Cl pH8.8）。

用0.45 μm的滤纸过滤，4 °C保存。(www.daowen.com)

（6）10%过硫酸铵

当加入水时，新鲜的过硫酸铵会发出“咔嚓”声音。如果没有声音，则需要换新的药品。可少量（10 mL）配制，分装后4 °C保存。

（7）电泳缓冲液（25mmol/L Tris，192 mmol/L glycine，0.1%SDS）

该溶液的pH不需调整，可直接在大试剂瓶中配制溶液，室温保存。

（8）琼脂糖封胶液

可在锥形瓶配制，微波炉加热熔化。小份分装，室温保存。

3. 凝胶加样缓冲液

4. 磷酸盐缓冲溶液（PBS）溶液

在800 mL蒸馏水中溶解8 g NaCl、0.2 g KCl、1.44 g Na2HPO4和0.24 g KH2PO4，用HCl调节溶液的pH至7.4，加水定容至1 L，在 1034×105 Pa高压下蒸气灭菌20 min，保存于室温。

5. 2×BES缓冲盐溶液

用总体积90 mL的蒸馏水溶解1.07 g盐溶液BES[N，N-双（2-羟乙基）-2-氨基乙磺酸]、1.6 g NaCl和0.027 g Na2HPO4，室温下用HCl调节该溶液的pH至6.96，然后加入蒸馏水定容至100 mL，用0.22 μm滤器过滤除菌，分装成小份，于-20 °C保存。

6. 2×HEPES缓冲盐溶液

用总量为90 mL的蒸馏水溶解1.6 g NaCl、0.074 g KCl、0.027 g Na2PO4·2H2O、0.2 g葡聚糖和1g HEPES，用0.5 mol/L NaOH调节pH至7.05，再用蒸馏水定容至100 mL。用0.22 μm滤器过滤除菌，分装成5 mL小份，于-20 °C保存。

7. 20×SSC

NaCl 175.3 g；柠檬酸钠 88.2 g；H2O 800 mL；用10 mol/L NaOH溶液调节pH至7.0后，定容至1 000 mL。

8. 20×SSPE

NaCl 175.3 g；Na2HPO4·H2O 27.6 g；EDTA 7.4 g；H2O 800 mL；用NaOH溶液调节pH至7.4后，定容至1 000 mL。

9. Tris缓冲盐溶液（TBS）（25 mmol/L Tris）

在800 mL蒸馏水中溶解8 g NaCl、0.2 g KCl和3 g Tris碱，加入0.015 g酚并用HCl调至pH至7.4，用蒸馏水定容1 L，分装后在1.034×105Pa高压下蒸汽灭菌20 min，于室温保存。

10. TNT

10 mmol/L Tris-Cl溶液（pH 8.0）；150 mmol/L NaCl溶液；0.05% Tween20。