实验中所使用的玻璃器皿清洁与否,直接影响实验结果,往往由于器皿的不清洁或被污染而造成较大的实验误差,甚至相反的实验结果。因此,玻璃器皿的洗涤清洁工作是非常重要的。
(一)初用玻璃器皿的清洗
新购买的玻璃器皿表面常附着有游离的碱性物质,可先用肥皂水(或去污粉)洗刷,再用自来水洗净,然后浸泡在盐酸1%~2%溶液中过夜(不少于4 h),再用自来水冲洗,最后用蒸馏水冲洗2~3次,在100~130 °C烘箱内烘干备用。
(二)使用过的玻璃器皿的清洗
1. 一般玻璃器皿:如试管、烧杯、锥形瓶等(包括量筒)。先用自来水洗刷至无污物,再选用大小合适的毛刷蘸取去污粉,将器皿内外,特别是内壁,用自来水冲洗干净后再用蒸馏水洗2~3次,烘干或倒置在清洁处,干后备用。凡洗净的玻璃器皿,不应在器壁上带有水珠,否则表示尚未洗干净,应再按上述方法重新洗涤。若发现内壁有难以去掉的污迹,应分别使用下述的各种洗涤剂予以清除,再重新冲洗。
2. 量器:如吸管、滴定管、量瓶等,使用后应立即浸泡于凉水中,勿使物质干涸。工作完毕后用流水冲洗,以除去附着的试剂、蛋白质等物质,晾干后浸泡在铬酸洗液中4~6 h(或过夜),再用自来水充分冲洗,最后用蒸馏水冲洗2~4次,风干备用。
3. 其他:具有传染性样品的容器,如分子克隆、病毒沾污过的容器,常规先进行高压灭菌或其他形式的消毒,再进行清洗。盛过各种毒品,特别是剧毒药品和放射性物质的容器,必须经过专门处理,确知没有残余毒物时方可进行清洗,否则使用一次性容器。
(三)洗涤液的种类和配制方法
1. 铬酸洗液(重铬酸钾-硫酸洗液,简称洗液或清洁液):广泛用于玻璃器皿的洗涤,常用的配制方法有以下4种:
(1)取100 mL硫酸置于烧杯内,小心加热,然后慢慢地加入5 g重铬酸钾,边加边搅拌,冷却后储存于带玻璃塞的细口瓶内。
(2)称取5 g重铬酸钾粉末置于250 mL烧杯中,加水5 mL,尽量使其溶解,慢慢加入100 mL浓硫酸,边加边搅拌,冷却后储存备用。
(3)称取80 g重铬酸钾,溶于1 000 mL自来水中,慢慢地加入浓硫酸1 000 mL,边加边搅拌。
(4)称取200 g重铬酸钾,溶于500 mL水中,慢慢加入浓硫酸500 mL,边加边搅拌。
2. 浓盐酸:可洗去水垢或某些无机盐沉淀。
3. 5%草酸溶液:可洗去高锰酸钾的痕迹。(www.daowen.com)
4. 5%~10%磷酸三钠溶液:可洗涤油污物。
5. 5%~10%乙二胺四乙酸二钠(EDTA)溶液:加热煮沸可洗去玻璃器皿内壁的白色沉淀物。
6. 30%硝酸溶液:洗涤CO2测定仪器及微量滴管。
7. 尿素洗涤液:为蛋白质的良好溶剂,适用于盛蛋白质制剂及血样的溶液。
8. 酒精与浓硝酸混合液:最适合于洗涤滴定管。在滴定管中加入3 mL酒精,然后沿管壁慢慢加入4 mL浓硝酸(相对密度1.4),盖住滴定管管口,利用所产生的氧化氮洗净滴定管。
上述洗涤液可多次使用,但使用前必须将待洗涤的玻璃器皿先用水冲洗多次,除去肥皂液、去污粉或各种废液。若容器上有凡士林或羊毛脂时,应先用软纸擦去,然后再用乙醇或乙醚擦净,否则会使洗涤液迅速失效。例如肥皂水、有机溶剂(乙醇甲醛等)及少量油污物均会使重铬酸钾-硫酸液变绿,降低洗涤能力。
(四)细胞培养玻璃器皿的洗涤处理
1. 按上述方法对玻璃器皿进行初洗,晾干。
2. 将玻璃器皿浸泡入洗液中24~48 h,注意玻璃器皿内应全部充满洗液,操作时小心勿将洗液溅到衣服及身体各部。
3. 取出,沥去多余的洗液。
4. 自来水充分冲洗。
5. 排列6桶水,前3桶水为去离子水,后3桶水为去离子双蒸水。
6. 将玻璃器皿依次洗过6桶水,玻璃器皿在每桶水中过6~8次。
7. 倒置,60 °C烘干。
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