此处主要介绍纸电泳法的操作。

纸电泳法是以滤纸为支持介质的电泳。纸电泳仪装置包括直流电源和电泳槽两部分。常压电泳一般为100～500 V，分离时间长，从数小时到几天，多用于分离大分子物质；高压电泳一般为500～10 000 V，电泳时间短，有时只需几分钟，多用于分离小分子物质。电泳槽可根据要求自制或购买，类型有水平式、悬架式和连续式等，要求能控制溶液的流动、能防止滤纸中的液体由于通电发热而蒸发。

（一）配制缓冲溶液

根据待测样品理化性质，选pH、离子强度适宜的缓冲液。电泳时将缓冲液加入两槽中浸没铂电极，并保持两槽的水平液面相同。

（二）滤纸的处理

一般选用新华层析滤纸，要求纸质均匀、吸附力小，否则将导致电场强度不均匀，区带不整齐。将滤纸放入1 mol/L甲酸溶液中，浸泡过夜，次日取出，用水漂洗至洗液的pH接近中性，置于60 °C的烘箱中烘干。根据要求和电泳槽规格裁好滤纸，一般可裁成长27 cm、宽18 cm的滤纸，并在长度方向距一端5～8 cm处作一起始线，每隔2.5～3 cm处作一记号供点样用。

（三）点 样

点样有湿法点样和干法点样两种方法。

1. 湿法点样

将裁好的滤纸全部放入电泳缓冲液中润湿，用镊子取出，将其夹在干净的干燥滤纸中吸干，然后平放在滤纸架上，使起始线靠近阴极端，将滤纸的两端浸入缓冲液中，在标记处点样。样品可点成长条形或圆点状，一般长条形分离效果好，但样品量少时，点成圆点状比较集中，便于显色。双向电泳必须点成圆点状。定量分析时，点样量必须准确。一般可用微量注射器点样，整个点样操作要快，点样完毕，立即开启电源进行电泳，以防止样品扩散。(www.daowen.com)

2. 干法点样

将样品直接点在滤纸的标记处，第一次样品晾干或冷风吹干后，再点第二次，依此类推，直至全部点完。点样完毕后，将滤纸两端浸入缓冲液中浸润至距样品数厘米处，立即取出，让缓冲液扩散至点样处，然后将滤纸置于支架上电泳。

（四）电 泳

点样完毕后，接通电源稳压挡，开启电源，根据滤纸有效长度计算电压梯度，并调整电压以在规定的范围内保持稳定。电泳一段时间后切断电源，一般判断方法是使样品圆点移动6～8 cm。立即连同支架取出滤纸，水平放置，用冷风吹干或烘干，使被分离的组分固定在滤纸上。

（五）染色或显色

根据被测组分的性质，可用紫外灯检测或用特定的显色剂显色。有适当的显色剂显色时，可用碘蒸气显色了解区带位置，进行检测。

（六）定性与定量

当成分不明确，可通过计算迁移率进行定性分析。定量分析时，将被测组分的区带分别剪下，置于洗脱液中，将各组分从滤纸中全部洗脱下来，用适当的方法测定其含量。也可将干燥后的纸电泳图谱放入色谱扫描仪，通过反射方式在记录器上自动绘出各组分的曲线图。