理论教育 电泳类型及应用-生物化学与分子生物学实验

电泳类型及应用-生物化学与分子生物学实验

时间:2023-11-18 理论教育 版权反馈
【摘要】:电泳类型目前还没有统一的划分标准,不同的划分依据所分类型也不同,见表1-1。表1-1电泳的类型通过本章的学习,我们了解了层析技术、分光光度技术、离心技术、透析超滤沉淀法及电泳技术的基本原理和应用。电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。

电泳类型及应用-生物化学与分子生物学实验

电泳类型目前还没有统一的划分标准,不同的划分依据所分类型也不同,见表1-1。

表1-1 电泳的类型

【小 结】

通过本章的学习,我们了解了层析技术、分光光度技术、离心技术、透析超滤沉淀法及电泳技术的基本原理和应用。层析技术又称色层分析法或色谱法,是一种基于被分离物质的物理、化学及生物学特性的不同,使它们在某种基质中移动速度不同而进行分离和分析的技术。分光光度技术是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。离心技术是根据颗粒在匀速圆周运动时受到一个外向的离心力的行为发展起来的一种分离分析技术。透析是利用蛋白质等生物大分子不能透过半透膜的性质,可对生物大分子进行除盐、除少量有机溶剂、除生物小分子杂质和浓缩的一类纯化技术。超滤是一种加压膜分离技术,即在一定的压力下,使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜,而使大分子溶质不能透过,留在膜的一边,从而使大分子物质得到了部分的纯化。沉淀是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程,根据不同物质在溶剂中的溶解度不同而达到分离的技术。电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。

【巩固练习】

1. 简述层析的分类,凝胶层析、离子交换层析及亲和层析的基本过程。(www.daowen.com)

2. 简述什么是郎伯-比尔定律,分光光度技术的基本应用。

3. 简述离心分离方法的分类及其原理。

4. 简述透析超滤沉淀法的分类、原理及其应用。

5. 简述电泳的基本原理及影响电泳分离的因素。

【实验小故事】

朗伯-比尔定律发现者约翰·海因里希·朗伯,12岁就离开学校,在从事多份工作之余,他仍然会利用时间读书进修。他做过的工作包括当裁缝父亲的助手、铁匠铺的记账员、报社的秘书和私人教师。在当私人教师时,他常常借助雇主家偌大的图书馆来求取学问,后来成为瑞士伟大的数学家、物理学家、天文学家和哲学家。约翰·海因里希·朗伯和他的老师皮埃尔·布格(法国物理学家)先后阐明了物质对光的吸收程度和吸收厚度之间的关系,直到奥古斯特·比尔(德国物理学家)提出了光的吸收程度与吸光物质浓度具有类似的关系,后人将两者结合起来形成了朗伯-比尔定律。正是由于各位科学家在各种困境下的坚持不懈,对知识孜孜不倦的追求,才有了现在伟大的发现—— 光吸收的基本定律。

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