根据厌氧系统中产甲烷微生态对氨浓度的响应规律，本论文提出了“临界氨浓度”的概念，即：在该氨浓度的胁迫下，产甲烷微生态处于不稳定状态，其种群结构和功能具有向不同方向发展的可能。根据本书第5章的研究结论，500 mmol/L和357 mmol/L的TAN浓度分别为高温和中温环境下的临界氨浓度。为研究驯化对氨胁迫下产甲烷微生态的影响，采用临界氨浓度作为本章预培养以及后续批式实验中形成氨胁迫的“高氨浓度”，以期观测到微生态的结构和功能因氨胁迫而发生变化演替的过程。

为获得驯化和未驯化的微生态，将高温污泥TCS和中温污泥MCS（见本书2.1.1章节），分别于55℃和35℃，在低氨浓度（TAN 10 mmol/L）和临界氨浓度（高温时TAN 500 mmol/L和中温时TAN 357 mmol/L）下进行预培养。初始乙酸浓度为80 mmol/L，初始pH为6.8。培养32 d后，各反应器的产甲烷过程均已进入稳定期，此时将污泥取出作为后续实验的接种物。其中，中温反应器内，于TAN 10 mmol/L下预培养的污泥称为NAMS（Non-acclimatized Mesophilic Sludge），作为未驯化的中温微生态；于TAN 357 mmol/L下预培养的污泥称为AMS（Acclimatized Mesophilic Sludge），作为驯化的中温微生态；高温反应器内，于TAN 10 mmol/L下预培养的污泥称为NATS（Non-acclimatized Thermophilic Sludge），作为未驯化的高温微生态；于TAN 500 mmol/L下预培养的污泥称为ATS（Acclimatized Thermophilic Sludge），作为驯化的高温微生态。(www.daowen.com)