在13C标记的乙酸被同化的过程中，功能微生物的DNA因富集了13C而密度提高，不活跃微生物的DNA则保持密度不变。本研究采用氯化铯超高速密度梯度离心法，根据密度差异将DNA进行分级分离。同一次分离过程中，对未标记实验和标记实验中取得的DNA进行平行操作。然后，根据两者的密度梯度分布图的差异，识别富集了13C的高密度组分和未富集标记物的低密度组分。

图6-3和图6-4展示了不同培养阶段各反应器内污泥样品DNA的CsCl密度梯度分布。未标记实验中，浮力密度为1.70～1.71 ng/mL的DAN组分浓度最高，代表了未标记DNA中含量最高的组分。而在标记实验中，浮力密度为1.73～1.75 ng/mL的DNA组分的浓度显著增加。随着培养时间的延长，该部分DNA逐渐成为含量最高的组分。因此，根据标记和未标记实验的比较结果，确认浮力密度在1.69～1.72 ng/mL和1.73～1.75 ng/mL的DNA分别为轻DNA组分和重DNA组分，将其回收并进行后续分析。标记实验中，重DNA组分的增加显示了微生物逐渐同化标记碳源的过程。

图6-3 TAN 19 mmol/L下DNA的CsCl密度梯度分布

注：黑色方框内为未标记的轻DNA组分L-D_H5；灰色方框内为标记的重DNA组分H-D_H5。(www.daowen.com)

本文对DNA组分的命名规则如下：以“H-D_L5”为例，第一部分象征DNA的密度差异，如“L-D”表示低密度DNA，“H-D”表示高密度DNA；第三个字母表示TAN浓度，如“L”表示19 mmol/L，“H”表示500 mmol/L；接下来的数字表示培养时间，如“5”表示培养5 d后。

图6-4 TAN 500 mmol/L下DNA的CsCl密度梯度分布

注：黑色方框内为未标记的轻DNA组分L-D_H9；灰色方框内为标记的重DNA组分H-D_H9。