核黄素（riboflavin，RF）又称维生素B2，是人体内重要的维生素，但是许多研究发现，RF是广泛存在于有氧细胞中的一种重要的内源性光敏剂，核黄素激发三重态具有较强的氧化性，有着复杂的光化学和光生物学性质。无论在生物体内还是体表的组织器官里（如眼睛和皮肤），在UVA与可见光的激发下，RF就能产生激发态，并与细胞内的DNA、蛋白质或其他组分发生反应，导致细胞死亡或加速衰老［9，12-15］。

在pH=7.2和N2饱和的条件下，355nm激光闪光光解RF水溶液能够引起RF发生光激发生成RF三重激发态（3 RF＊）。3 RF＊分别在300nm，380nm，520nm和680nm处具有四个特征吸收峰［180］。H（2）S能够显著加快3 RF＊在680nm处的动力学衰减（图7-7）。在三种pH值条件下，按照公式（2-13），通过线性拟合在不同Na2S浓度下3 RF＊在680nm处的kobs与相应Na2S浓度值，本章计算出了3RF＊与H（2）S的反应速率常数（表7-2）。可以看出，无论H（2）S的哪种形式，均能够以扩散速率控制的反应速率猝灭3 RF＊。

图7-7　在pH=7.2和N2饱和的条件下，355nm激光闪光光解RF（0.1mM）和不同浓度Na2S（0mM，0.223mM和0.669mM）的水溶液所得到的在680nm处的动力学衰减曲线

(www.daowen.com)

图7-8　（A）在pH=7.2和N2饱和的条件下，355nm激光闪光光解RF（0.1mM）和Na2S（1.5mM）的水溶液所得到的在1.8μs（）时刻的瞬态吸收谱图。插图：在相同条件下所得到的3 RF＊在680nm的动力学衰减曲线。（B）在相同条件下所得到的在320nm和680nm处的动力学衰减曲线，以及从320nm的动力学衰减中减去680nm的动力学衰减后所得的RFH·在320nm处的动力学生成过程。（C）在相同条件下所得到的在520nm和680nm处的动力学衰减曲线，以及从520nm的动力学衰减中减去680nm的动力学衰减后所得的RFH·在520nm处的动力学生成过程

在pH=7.2和N2饱和的条件下，355nm激光闪光光解RF和Na2S的水溶液所得到的在680nm处的动力学衰减表明（图7-8A插图），3 RF＊在680nm处的衰减在1.5μs以后就达到0点，这说明1.5μs之后3 RF＊已经衰减完全。相同条件下在1.8μs时刻的瞬态吸收谱图表明，当3 RF＊衰减完全后，分别在320nm和530nm处出现两个寿命较长的瞬态吸收（图7-8A），这两处的瞬态吸收非常符合已报道的使用激光闪光光解和脉冲辐解技术得到的RF中性自由基的瞬态吸收（RFH·，pKa=8.3）［181，182］。因此断定在本章中，3 RF＊与H（2）S的反应生成了RFH·，即3 RF＊与H（2）S之间发生了电子转移反应。由于3 RF＊的吸收波段较宽且强度很强，很难观察到RFH·的生成过程。为此通过减谱方法，可得到RFH·在320nm和520nm处的生成过程（图7-8B和C）。在生物体内，内源性硫化氢在H2O2和过氧化物酶的共同作用下一般被氧化为含硫自由基（HS·或者S·）［168，183］，在这里，H（2）S也很有可能被3 RF＊氧化为HS·或者S·。

表7-2　在不同pH值条件下，H（2）S与TyrO·，TrpN·和3 RF＊的反应速率常数（单位：M-1s-1）