为了考察ROAT+是否具有损伤蛋白质的潜力，本章研究了ROAT+对Trp，Tyr，L-半胱氨酸（Cys）和溶菌酶的反应活性。

在pH=7.4和O2饱和的条件下，355nm激光闪光光解ROH和Trp的微乳体系所得到的动力学衰减曲线表明，Trp的存在能够加快ROAT+在580nm处的动力学衰减（图5-19A），说明ROAT+能够和Trp反应。同样，将Trp浓度值与对应Trp浓度下ROAT+在580nm处的kobs按照公式（2-13）进行线性拟合（图5-19B），计算出它们之间的反应速率常数（表5-1）。但是无法从瞬态谱图中找到ROAT+和Trp发生电子转移反应的证据。

图5-19　（A）在pH=7.4条件下，355nm激光闪光光解ROAT（0.05mM）和不同浓度Trp的微乳体系所得到的ROAT+在580nm的动力学衰减曲线。（B）ROAT+在580nm的kobs与相应Trp浓度值之间的线性拟合

在pH=7.4和O2饱和的条件下，355nm激光闪光光解ROAT和Cys的微乳体系所得到的瞬态吸收谱图表明，随着ROAT+的特征吸收峰的衰减，在380nm处出现一个新的瞬态吸收峰（图5-20），此外，Cys的存在能够加速ROAT+在580nm处的动力学衰减（图5-20插图），因此可以得出ROAT+与Cys发生反应生成了在380nm具有吸收的瞬态物质。对380nm处瞬态产物的归属是非常困难的，一方面是由于ROAT+不是单一瞬态物质，另一方面正如第四章分析ROH·+与Cys反应机理时所讨论的，ROAT+与Cys无论发生电子转移反应还是加成反应，都有可能生成在380nm附近具有吸收的瞬态物质。(www.daowen.com)

图5-20　在pH=7.4和O2饱和的条件下，355nm激光闪光光解ROAT（0.075mM）和Cys（4mM）的微乳体系所得到的在0.1μs（）和6μs（）的瞬态吸收谱图。插图：在不同浓度Cys（1.6mM，2.8mM和4mM）的存在下，ROAT+在580nm处的动力学衰减曲线

通过公式（2-13）本文计算出了ROAT+与Cys，Lyso和亚油酸之间的反应速率常数（表5-1），但是无法证明ROAT+能够与Tyr发生反应。总之，这些结果表明，ROAT+不仅具有损伤蛋白质和多肽的潜力，而且也可能会作用于生物膜的不饱和脂肪酸，引起生物膜损伤。