理论教育 常用植物组织培养基配方—《遗传学实验教程》

常用植物组织培养基配方—《遗传学实验教程》

时间:2023-11-01 理论教育 版权反馈
【摘要】:这样,每次配制培养基时,量取母液总量的1/10、1/100或1/1 000,加以稀释即可。每配制1 000mL培养基量取1mL。配制时各成分按培养基质量浓度含量扩大100倍,每次可配100mL。

常用植物组织培养基配方—《遗传学实验教程》

1.MS培养基(pH5.8~6.0)

2.N6培养基(pH5.6~5.8)

续表

3.B5培养基(pH5.5)

4.1/2 MS培养基配方

MS培养基的大量元素含量减半,其他各成分的含量不变,pH5.8~6.0。

5.MSB培养基配方

MS培养基的无机成分与B5培养基的有机成分的混合物,pH5.8~6.0。

6.Kao’s 原生质体培养基(pH5.6)

7.SH 培养基(pH5.4)

8.植物激素贮备液的配制

9.培养基配制说明

配制培养基时,为了避免每次配制都要对几十种化学药品进行称量,可以将培养基中的各种成分,按用量的10倍、100倍或1 000倍配成浓缩液,这种浓缩液称为母液。这样,每次配制培养基时,量取母液总量的1/10、1/100或1/1 000,加以稀释即可。(www.daowen.com)

(1)大量元素母液的配制

大量元素包括硝酸钾等用量较大的几种化合物。配制时各成分按培养基质量浓度含量扩大10倍称量,用蒸馏水单独溶解,按表中排列的顺序依次搅拌混合,最后用蒸馏水定容至1 000mL,就是10倍的大量元素母液。贴好标签,于4℃冰箱保存。每配制1 000mL培养基量取100mL。

配制时需注意:各种化合物必须充分溶解后再混合,混合时注意先后顺序,某些无机成分如Ca2+等易与SO42-和H2PO4发生反应产生沉淀。CaCl2·2H2O需要加热溶解,最好单独加入。

(2)微量元素母液的配制

因微量元素用量较少,为了精确和称量方便,配制时各成分按培养基质量浓度含量扩大1 000倍称量,但考虑到用量少,长期贮存易霉变和浪费,每次可配100mL。配制时也要注意顺次溶解后再混合,且Na2MoO4·2H2O需要单独溶解最后加入。贴好标签,于4℃冰箱保存。每配制1 000mL培养基量取1mL。

(3)铁盐母液的配制

铁盐必须单独配制,若同其他无机元素混合配成母液,则易产生沉淀。配制时各成分按培养基质量浓度含量扩大100倍称量,每次可配100mL。用棕色瓶盛装,贴好标签,于4℃冰箱保存。每配制1 000mL培养基量取10mL。

配制时需注意:如果FeSO4和Na2EDTA螯合不彻底,冷藏后FeSO4会结晶析出。配制时两种成分单独加热溶解后再混合,同时置于加热搅拌器上不断搅拌螯合,直至溶液呈金黄色(约需20min),冷却后再置于冰箱。

(4)有机物质母液的配制

有机物质主要指氨基酸和维生素类物质。原则上各种成分应单独配制母液。配制时各成分按培养基质量浓度含量扩大100倍,每次可配100mL。贴好标签,于4℃冰箱保存。每配制1 000mL培养基量取10mL。

配制时需注意:由于有机物质母液营养丰富,贮藏和使用过程中容易染菌,如果溶液变浑浊或出现絮状物就不可再用。配制母液时最好用无菌蒸馏水溶解各成分,或少量多次配制,缩短贮存时间。

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