1.微量元素溶液(基本培养基和杂交培养基用)
柠檬酸·H2O 0.5g
ZnSO4·7H2O 0.5g
Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O 0.1g
CuSO4·5H2O 0.025g
H3BO3 0.005g
Na2MoO4·2H2O 0.005g
MnSO4·4H2O 0.005g
蒸馏水定容至 1 000mL
2.基本培养液
KH2PO4 5.0g
柠檬酸钠(Na3C6H5O7·2H2O) 3.0g
NH4NO3 2.0g
MgSO4·7H2O 0.2g
CaCl2·2H2O 0.1g
10mg/mL生物素溶液 1.0mL
微量元素溶液 1.0mL
蒸馏水定容至 1 000mL
加入2.0%蔗糖和1.5%琼脂粉,就是固体基本培养基。
3.杂交培养基
KH2PO4 1.0g
KNO31.0g
MgSO4·7H2O 0.5g
CaCl2·2H2O 0.1g
NaCl 0.1g
10mg/mL生物素溶液 1.0mL
微量元素溶液 1.0mL
蔗糖 20.0g
琼脂粉 15.0g(www.daowen.com)
蒸馏水定容至 1 000mL
4.完全培养基
基本培养液 1 000mL
酵母浸膏 5.0g
麦芽汁(可不加) 5.0g
酶解酪素 1.0g
维生素混合液(按以下配方配制) 10mL
盐酸硫胺素 0.1g
胆碱 0.1g
肌醇 0.1g
泛酸钙 0.05g
对-氨基苯甲酸 0.005g
烟酰胺 0.005g
盐酸吡哆醇 0.005g
核黄素 0.005g
叶酸 0.001g
蒸馏水定容至 1 000mL
蔗糖 20.0g
琼脂粉 15.0g
用1%甘油代替蔗糖,可获得大量的分生孢子。
5.补充培养基
在基本培养基中补加一种或多种生长物质,如氨基酸、核酸碱基、维生素等。氨基酸的用量一般是在1 000mL基本培养基中加入0.05~0.1g。
在粗糙链孢霉顺序四分子分析实验中,所用补充培养基是在基本培养基中加入适量的赖氨酸,赖氨酸缺陷型菌株就能良好生长。
6.马铃薯培养基
将洗净的马铃薯去皮切碎,称取200g,加入1 000mL蒸馏水中,煮熟并搅拌成糊状,然后用多层纱布过滤,弃去残渣,滤下的汁中加入2%琼脂和2%蔗糖,煮融后分装到试管中。也可将马铃薯切成黄豆大小碎块,每支试管放4~5块,再加入融化的琼脂和蔗糖。
上述培养基分装试管后,在0.055 MPa(111℃)条件下灭菌30min,取出趁热摆成斜面,可代替完全培养基使用。如培养缺陷型菌株,需在灭菌前补加相应氨基酸。
7.玉米杂交培养基
将玉米浸泡软化后破碎,每支试管(φ18mm×180mm)放置3~4粒,加入少量含1%琼脂的蒸馏水,使其浸没玉米粒,然后插入一条折成屏风状的滤纸条(4cm×10cm,插入的一头剪去两个角),加上棉塞或硅胶塞,再高温高压灭菌,不需摆斜面。
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