(1)采样信息
为了获得全面客观的数据,我们将中国、日本、韩国以及东南亚部分地区一并纳入研究范围,所用标本(自2010年9月开始)经实地采集、委托采集以及国际赠送等方式收集,历时4年完成。
我国采样点涵盖了宽带果实蝇发生的19个省份,包括云南、四川、重庆、贵州、陕西、山西、广西、广东、福建、湖南、湖北、安徽、河南、上海、浙江、江西、江苏、海南和台湾,共设置了38个诱捕点,同一省份如有两个以上诱捕点则分别设置在北部、中部或者南部,保证标本有一定的地域代表性。3个省区13个诱捕点未诱集到宽带果实蝇,包括四川省攀枝花市(PZH)、米易县(SMY)、德昌市(SDC)、西昌市(SXC)、仁寿县(SRS),台湾地区台北市(TP)、台东县(TD),以及海南省海口市(HHK)。
东南亚国家采样点涵盖了5个国家,系国内出访人员进行国际交流时协助采集,包括泰国清迈(CHM)、老挝丰沙里(PHS)、越南河内(HAN)、柬埔寨吴哥(ANK)和马来西亚槟城(PEN),所获标本中均无宽带果实蝇。
日本采样点位于中部京都大学(Kyoto University),由京都大学农业研究院Ritsuo Nishida教授赠送10个样本。冲绳岛地区5条宽带果实蝇基因全序列系GeneBank下载(见表2.2)。
韩国采样点位于中部偏西地区的宏盛市(Hongseng,HON),未诱捕到宽带果实蝇。
本研究采样范围涵盖了世界宽带果实蝇主要发生区,共获得26个宽带果实蝇地理种群,确定451个宽带果实蝇实验样本量。
(2)诱捕方法
标本采集使用性诱剂诱捕方式获得,所使用诱捕装置由广东昆虫研究所提供,长15cm,直径10cm,内悬长4cm、直径2cm的脱脂棉作为诱芯,诱芯上滴加甲基丁香酚(Methyleugenol,Me)、诱蝇酮(Cue-lure)和有机磷杀虫剂,两侧分别开1cm×1.5cm的小窗口,便于诱剂气味缓慢散发以及供实蝇进入。诱捕器悬挂于果园或者蔬菜园中通风处,离地面约1.5m,固定好使之不易摆动或脱落,不受寄主植物遮蔽,诱捕时间为10~30d(如图2.1)。详细采样点名称、代码、坐标、海拔等信息见表2.1。
(www.daowen.com)
图2.1 宽带果实蝇诱捕装置
Fig. 2.1 The trapping device for Zeugodacus scutellatus
(3)保存及鉴定
样本采集后用95%的无水乙醇浸泡于15mL的本色广口塑料瓶中,置于-20℃冰箱保存。供试时根据形态特征鉴定为宽带果实蝇,挑选外形完好、体表无附着物的样本进行实验。
表2.1 宽带果实蝇样本采集信息
Tab.2.1 Information on Sampling sites of Zeugodacus scutellatus
续表 2.1
表2.2 GeneBank中宽带果实蝇cox1和cox2全序列登录号
Tab.2.2 Accession numbers of the cox1 and cox2 of Zeugodacus scutellatus in GeneBank
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