旋光度除了取决于被测分子的立体结构特征外，还受多种实验条件的影响，例如浓度、样品管长度、温度和光源波长等。

1.比旋光度

“旋光度”这个物理化学量只有相对含义，它可以因实验条件的不同而有很大的差异。所以又提出了“比旋光度”的概念，规定以钠光灯D线作为光源，温度为20℃时，一根10cm长的样品管中，每立方厘米溶液中含有1g旋光物质所产生的旋光度，即为该物质的比旋光度，通常用符号［α］表示，它与上述各种实验因素的关系为：

式中：α为测量所得的旋光度值，l为样品管长度（cm），c为每立方厘米溶液中旋光物质的质量。比旋光度可用来度量物质的旋光能力，并有左旋和右旋的差别，这是指测定时检偏镜是沿逆时针还是顺时针方向转动得到的数据，如果是左旋，则在［α］值前面加“－”号。例如［α］葡萄糖＝52.5°，［α］蔗糖＝66.55°，都是右旋物质，［α］果糖＝－91.9°是左旋物质。

2.浓度及样品管长度的影响

旋光度与旋光物质的溶液浓度成正比，在其他实验条件相对固定的情况下，可以很方便地利用这一关系来测量旋光物质的浓度及其变化（事先作出浓度—旋光度的标准曲线）。

旋光度也与样品管长度成正比，通常旋光仪中的样品管长度为10cm或20cm两种，一般均选用10cm长度的，这样换算成比旋光度比较方便，但对于旋光能力较弱或溶液浓度太稀的样品，则须用20cm长的样品管。(www.daowen.com)

3.温度的影响

旋光度对温度比较敏感，这涉及旋光物质分子不同构型之间平衡态的改变，以及溶剂－溶质分子之间互相作用的改变等内在原因。但就总的结果来看，旋光度具有负的温度系数，并且随着温度升高，温度系数愈负，不存在简单的线形关系，且随各种物质的构型不同而异，一般均在－（0.01～0.04）度－1之间。因此在测试时必须对试样进行恒温控制，在精密测定时必须用恒温水夹套的样品管，恒温水由超级恒温浴循环控制。在要求不太高的测量工作中可以将旋光仪（光源除外）放在空气恒温箱内，用普通的样品管进行测量，但要求被测试样预先恒温（温度与恒温箱中的温度相同，一般选择在超过室温5℃的条件下进行），然后注入样品管，再恒温3min～5min进行测量。

4.其他因素的影响

这里值得一提的是样品管的玻璃窗口，如图1－28所示，窗口是用光学玻璃片加工制成的，用螺丝帽盖及橡皮垫圈拧紧，但不能拧得太紧，以不漏液为限，否则光学玻璃会受应力而产生一种附加的亦即“假的”偏振作用，给测量造成误差。

图1－28　样品管的构造