培养特征是指细菌群体在培养基上的形态和生长习性,包括平板、斜面及液体培养等状况。各种细菌在某一鉴定培养基上均能产生固有的菌落形态和生长特征。
1.平板菌落的特征 在分离和纯化菌株时,利用菌落的特征检查菌株的纯度很重要,但应注意的是菌落的形态随培养基的组成、培养时间和温度的不同可能会发生改变。
(1)制平板。将牛肉膏蛋白胨融化后冷却至50℃左右,无菌操作到平板,凝固后成为琼脂平板,待平板表面水珠干后再使用,这样有利于单菌落的形成。
(2)平板划线。取少许菌苔或菌液平板划线,以便长出单菌落(见划线法)。
(3)培养观察。将培养皿倒置,适温培养1~7天,观察单菌落的下列特征:大小和形态、表面(光滑、粗糙、皱纹、同心环、辐射状等)、边缘(光滑、锯齿状、波浪状、纤维状等)、隆起(凸、凹、平),荧光的有无、透明度及培养基的颜色、黏度等。
平板菌落特征如图17-24所示。
图17-24 平板菌落特征
a)细菌菌落的描述 b)细菌菌落的形状
2.斜面菌苔的特征 斜面是日常接触最多的培养物,认识斜面菌苔的特征,对掌握菌种是否受污染有所帮助。
(1)划线接种。用接种环挑取少量菌种于斜面上划一直线(由下而上),适温培养。注意在接种前,斜面切勿平放,否则底部凝结水倒流表面,划线培养后菌苔会随水扩散,不能观察到典型的菌苔特征。(www.daowen.com)
(2)培养观察。根据生长情况,在1~7天内观察菌苔的下列特征:丰厚程度即生长量(良好、微弱、不生长等)、边缘和表面形态、颜色、黏度、培养基颜色、透明度以及气味等。
琼脂斜面划线培养特征如图17-25所示。
图17-25 琼脂斜面划线培养特征
3.培养液中的生长特征
(1)接种。将配好的牛肉膏蛋白胨培养液过滤澄清后,在121℃下灭菌20min,冷却后,取少量菌体接入培养液中。
(2)培养观察。在适温下静置培养1~7天,观察培养液的浑浊状态(整个培养液呈浑浊状态,并均匀一致)、沉淀(絮状、黏液状、颗粒状、块状沉淀等)、结膜(液面呈一层薄膜或厚膜,有的沿试管壁长一圈),以及有无气泡、气味等。液体培养特征如图17-26所示。
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