理论教育 细菌运动性观察:幼龄菌体的运动性及速度

细菌运动性观察:幼龄菌体的运动性及速度

时间:2023-10-18 理论教育 版权反馈
【摘要】:有鞭毛的细菌在幼龄时具有较强的运动性,衰老的细胞鞭毛易脱落,故观察时宜选用幼龄菌体。细菌的运动速度根据菌种不同而异,应仔细观察。

细菌运动性观察:幼龄菌体的运动性及速度

1.原理 细菌是否具有鞭毛是细菌分类鉴定的重要特征之一。采用鞭毛染色法虽能观察到鞭毛的形态、着生位置和数目,但此法既费时又麻烦。如果只需查清供试菌是否有鞭毛,可采用悬滴法或水封片法(即压滴法)直接在光学显微镜下检查活细菌是否具有运动能力,以此来判断细菌是否有鞭毛,此法较快速、简便。

悬滴法就是将菌液滴加在洁净的盖玻片中央,在其周边涂上凡士林,然后将它倒盖在有凹槽的载玻片中央,即可放置在普通光学显微镜下观察。水封片是将菌注解滴在普通的载玻片上,然后盖上盖玻片,置于显微镜下观察。

大多数球菌不生鞭毛,杆菌中有的有鞭毛,有的无鞭毛,弧菌和螺菌几乎都有鞭毛。有鞭毛的细菌在幼龄时具有较强的运动性,衰老的细胞鞭毛易脱落,故观察时宜选用幼龄菌体。

2.器材

(1)活材料:培养12~16h的枯草杆菌、金黄色葡萄球菌和荧光假单胞菌。

(2)试剂:香柏油、二甲苯、凡士林等。

(3)器材:凹载玻片、盖玻片、镊子、接种环、滴管、擦镜纸、显微镜。

3.方法

(1)制备菌液:在幼龄菌斜面上,滴加3~4mL无菌水,制成轻度浑浊的菌悬液。

(2)涂凡士林:取洁净无油的盖玻片1块,在其四周涂少量的凡士林。

(3)滴加菌液:加1滴菌液于盖玻片的中央,并用记号笔在菌液的边缘做一记号,以便在显微镜中观察时,易于寻找菌液的位置。

(4)盖凹载玻片:将凹载玻片的凹槽对准盖玻片中央的菌液,并轻轻地盖在盖玻片上,使两者粘在一起,然后翻转凹波片,使用权菌液正好悬在凹槽的中央,再用铅笔或火柴棒轻压盖玻片,使凹载玻片四周边缘闭合,以防菌液干燥,细菌悬滴制片法如图17-14所示。(www.daowen.com)

若制水浸片,则在凹载玻片上滴加一滴菌液,盖上盖玻片后即可置于显微镜下观察。

(5)镜检:先用低倍镜找到标记,再稍微移动凹载玻片即可找到菌滴的边缘,然后将菌液移到视野中央换高倍镜观察。由于菌体是透明的,镜检时可适当缩小光圈或降低聚光器以增大反差,以便于观察。镜检时要仔细辨别是细菌的运动还是分子运动(即布朗运动),前者在视野下可见细菌自一处游动至它处,而后者仅在原地左右摆动。细菌的运动速度根据菌种不同而异,应仔细观察。

结果:有鞭毛的枯草杆菌和假单胞菌可看到活跃的运动,而无鞭毛的金黄色葡萄球菌不运动。

4.实验结果 绘出所看到的细菌的形态图,并用箭头表示其运动方向。

5.注意事项

(1)检查细菌运动的载玻片和盖玻片都要洁净无油,否则将影响细菌的运动。

(2)制水浸片时菌液不可加得太多,过多的菌液会在盖玻片下流动,在视野内只见大量的细菌朝一个方向运动,从而影响对细菌正常运动的观察。

(3)若使用油镜观察,应在盖玻片上加一滴香柏油。

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图17-14 细菌悬滴制片法

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