理论教育 显微镜技术及应用电镀废水处理荧光显微镜与真空系统

显微镜技术及应用电镀废水处理荧光显微镜与真空系统

时间:2023-10-18 理论教育 版权反馈
【摘要】:在使用暗视显微镜时,需要调节聚光器的点与被检物体在同一平面上,并且需要选用较薄的载玻片,否则不易看见被检物。荧光显微镜多利用紫外光和短波作光源,多数细胞需要用荧光染料或荧光抗体染色后,才能进行荧光观察。为了获得镜筒的高真空环境,常采用二级串联的真空系统,由机械泵和油扩散泵组成。

显微镜技术及应用电镀废水处理荧光显微镜与真空系统

微生物个体微小,必须借助显微镜才能观察到它的个体形态和细胞构造,目前使用的有普通光学显微镜、暗视显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和电子显微镜,主要的机械部件其功能和名称是相同的,因篇幅有限,这里仅介绍它们的光学不同之处,具体使用时可仔细阅读《产品使用手册》。

1.普通光学显微镜

(1)普通光学显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成,机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗调螺旋和微调螺旋等;光学系统由反光镜、聚光器、物镜和目镜等组成。

(2)分辨能力的高低决定于光学系统各部件的质量,物像放大后,能否呈现清晰的细微结构,主要取决于物镜的性能,其次为目镜和聚光器的性能。

(3)照明光线从标本下方经过聚光器汇聚后透过标本,进入物镜。

普通光学显微镜适合于观察对光可透的标本。

2.暗视显微镜 样品受侧向光照射时所产生的散射光进入物镜,来分辨样品细节,可观察到标本的细微部分,如细菌鞭毛的运动

在使用暗视显微镜时,需要调节聚光器的点与被检物体在同一平面上,并且需要选用较薄的载玻片,否则不易看见被检物。

3.相差显微镜 由于细胞各部分的折射率和厚度不同,光线通过后,直射光和衍射光的相位会有差别,产生相位差。人的肉眼感觉不到光的相位差,但相差显微镜能通过其特殊装置——环状光阑和相板,利用光的干涉现象,将光的相位差转变为人眼可以察觉的振幅差(明暗差),从而观察到物像。(www.daowen.com)

4.荧光显微镜 利用一定波长的光使镜下标本受激发产生荧光,通过物镜和目镜系统放大以供观察。荧光显微镜多利用紫外光和短波作光源,多数细胞需要用荧光染料或荧光抗体染色后,才能进行荧光观察。不同的生物体对激发光的要求不同,需要利用不同的激发滤色镜,来得到最佳的激发光源。

5.电子显微镜 人的眼睛只能分辨0.1mm以上的物体,光学显微镜的分辨率为200nm,电子显微镜的分辨率为0.2nm,放大倍数可达100万倍。1m=103mm=106μm=109nm。

电子显微镜结构较为复杂,包括电子射线源、电子透镜——成像系统、真空系统及电源设备。

(1)电子射线源。利用电子波成像,就需要足够数量的电子,通常采用热阴极,即用0.5mm左右的钨丝弯成V字形,做成灯丝,通过电流加热至2000℃以上,钨丝受热发射的电子作为电子源,在灯丝前用一圆形、磨光的有小孔的金属板作为阳极,在阳极和阴极之间加上几万伏特的电压,使灯丝发射出来的电子加速,经聚焦过程射到样品上。

(2)电子透镜。电子显微镜的电子波,可以借电磁透镜的磁场的吸引,而发生偏析放大物体,改变电磁透镜线圈中的电流,就能很方便地改变放大倍数。在电子显微镜中,电子枪所发生的电子束,经过电磁透镜的会聚到达观察的样品上,电子经过样品,由于样品的厚度和密度不同,因此透过的电子就有疏密的区别,电子在荧光屏上的反差不同,它们通过物镜后形成初步放大的物像,再经过投影镜放大后,投影到荧光屏上,显示出最后的放大物像。移开荧光屏就可使其下面的底片曝光,再经过印相、放大等步骤即可得到电镜照片。

为了增加放大倍数,用两个投影镜。整个电子发射、聚焦和记录系统都在密闭的高真空环境中。

(3)真空系统。真空是保证电子显微镜正常工作的必要条件,在真空条件下,阴极与阳极间不至于放电,灯丝不会被氧化或被阳离子轰击而减短寿命,电子束在射程中与空气分子碰撞的机会少,减少了散射电子,增加了影像的对比度,容易获得高分辨率的图像。为了获得镜筒的高真空环境,常采用二级串联的真空系统,由机械泵和油扩散泵组成。先由机械泵抽到1000Pa以上的低真空,然后借助油扩散泵,将真空度进一步提高到0.01~10Pa左右。由于油扩散泵中的油蒸汽要用水冷却后才能凝结进行循环工作,所以油扩散泵要用自来水冷却。整个电镜采用大大小小的圆形密封橡皮圈于金属部位的连接处,来达到真空密封要求。

(4)电源设备。主要包括三个部分,第一部分是与电子枪有关的线路,第二部分是与透镜有关的线路,第三部分是真空系统所需的电源。

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