理论教育 水浸制片观察法,菌丝分散方法

水浸制片观察法,菌丝分散方法

时间:2023-10-17 理论教育 版权反馈
【摘要】:1)水浸制片观察法在载玻片上滴加1滴乳酸石炭酸棉蓝染色液或蒸馏水,用解剖针从生长有霉菌的平板中挑取少量带有孢子的霉菌菌丝,用50%的乙醇浸润,再用蒸馏水将浸过的菌丝洗一下,然后放入载玻片上的液滴中,仔细地用解剖针将菌丝分散开来。

水浸制片观察法,菌丝分散方法

1)水浸制片观察法

在载玻片上滴加1滴乳酸石炭酸棉蓝染色液或蒸馏水,用解剖针从生长有霉菌平板中挑取少量带有孢子的霉菌菌丝,用50%的乙醇浸润,再用蒸馏水将浸过的菌丝洗一下,然后放入载玻片上的液滴中,仔细地用解剖针将菌丝分散开来。盖上盖玻片(勿使产生气泡,且不要再移动盖玻片),先用低倍镜,必要时转换高倍镜镜检并记录观察结果。

2)玻璃纸透析培养观察法

(1)玻璃纸的选择与处理

要选择能够允许营养物质透过的玻璃纸。也可收集商品包装用的玻璃纸,加水煮沸,然后用冷水冲洗。经此处理后的玻璃纸若变硬,必定是不可用的,只有那些软的可用。将那些可用的玻璃纸剪成适当大小,用水浸湿后,夹于旧报纸中,然后一起放入平皿内121℃灭菌30 min备用。(www.daowen.com)

(2)菌种的培养

按无菌操作法,倒平板,冷凝后用灭菌过的镊子夹取无菌玻璃纸贴附于平板上,再用接种环蘸取少许霉菌孢子,在玻璃纸上方轻轻抖落于纸上。然后将平板置28~30℃下培养3~5 d,曲霉菌和青霉菌即可在玻璃纸上长出单个菌落(根霉菌的气生性强,形成的菌落铺满整个平板)。

(3)制片与观察

剪取玻璃纸透析法培养3~4 d后长有菌丝和孢子的玻璃纸一小块,先放在50%乙醇中浸一下,洗掉脱落下来的孢子,并赶走菌体上的气泡,然后正面向上贴附于干净载玻片上,滴加1~2滴乳酸石炭酸棉蓝染色液,小心地盖上盖玻片(注意不要产生气泡),且不要移动盖玻片,以免搞乱菌丝。标本片制好后,先用低倍镜观察,必要时再换高倍镜。青霉注意观察菌丝有无隔膜,分生孢子梗及其分枝方式,梗基、小梗及分生孢子的形状;曲霉注意观察菌丝有无隔膜、足细胞、分生孢子梗、顶囊、小梗及分生孢子的着生状况和形状;根霉注意观察其无隔膜菌丝、匍匐枝、假根、孢子囊柄、孢子囊及孢囊孢子,孢子囊破裂后可观察到囊托和囊轴;毛霉注意观察其无隔膜菌丝、假根、孢子囊柄、孢子囊及孢囊孢子等。

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