流行病学数据显示，吸烟能够降低一些疾病，如溃疡性结肠炎、结节病、子宫内膜异位症、子宫肌瘤、子宫内膜癌症、农民肺、帕金森氏病和阿尔茨海默病的发病率和严重性^[82～84]，这些疾病多是与人体免疫系统相关的炎症性疾病或具有炎症成分。免疫系统是实现免疫功能的器官或组织，可分为外周免疫器官和中枢免疫器官两部分，以外周免疫器官淋巴结来源的小鼠淋巴瘤细胞（EL-4细胞）和中枢免疫器官胸腺来源的小鼠巨噬细胞（Ana-1细胞）作为研究对象，参比卷烟3R4F烟气总粒相物TPM染毒后，采用Luminex检测如表2.2所示中细胞因子的变化。

表2.2 6类20种细胞因子

Luminex液相芯片检测系统整合微球双荧光标记和液流分散激光自动检测技术，可自动实现核酸、酶、受体、抗体、抗原、小分子有机物等多通道高通量分析。核心技术为特制的 100种不同色标编码的 5.6μm塑料小球或6.5μm的磁珠。每一种编码的小球标记一种可以捕获相应目标分子的配体，任选几种或多至100种标记好的小球混合后与样品中待检目标分子作用。由于每种小球标上不同的探针分子从而可以对样本中多大100中的不同种目标分子进行同步检测。

TPM染毒后，随着染毒剂量的增加，EL-4细胞中GM-CSF、IL-10和VEGF等3种细胞因子的分泌量均下调；Ana-1细胞中MCP-1、MIP-1α和TNF-α等3种细胞因子的分泌量均上调。TPM染毒会引起EL-4和Ana-1细胞中不同细胞因子分泌量的改变，而采用两种细胞有利于较全面地评价卷烟烟气的体外免疫毒性。

对7种代表性卷烟样品，包括不同焦油量卷烟样品[高焦油（焦油量9～11mg/支）、中焦油（焦油量7～8mg/支）、低焦油（焦油量1～6mg/支）]和不同卷烟类型（混合型与烤烟型），进行Ana-1细胞的体外免疫毒性评价，结果见表2.3。(www.daowen.com)

表2.3 7种卷烟样品的焦油量、类型及细胞毒性

基于7种卷烟品牌的5个剂量（0，2.5，5，10和20μg/mL）制作的细胞因子分泌量的热点图。细胞因子的分泌量在经log₂标化后，计算各剂量占最高分泌量的百分比，并采用逐渐改变的颜色表示细胞因子分泌量的高低。如图2.6所示，与细胞因子最高分泌量相比，多种细胞因子的分泌量改变较小，如IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-10、IL-13、IL-17、GM-CSF、IFN-γ、KC、MIG和FGF-basic。同时，与细胞因子最高分泌量相比，一些细胞因子的分泌量改变较大，如IL-5、IL-6、IL-12、TNF-α、VEGF、IP-10、MCP-1和MIP-1α。

图2.6 7种不同卷烟免疫毒性的轮廓谱分析结果。（1）～（5）分别是7种卷烟的5个剂量（0，2.5，5，10和20μg/mL）的20种细胞因子分泌量的热点图