1.时间定额
90min内完成所有考核内容。
2.安全文明操作
1)正确执行实验室安全操作规程。
2)遵守实验室规则,认真、如实记录试验数据。
3)保持试验台面及周围环境整洁,仪器、用品摆放整齐。
3.操作步骤
(1)吸收池配套性检查 石英吸收池在220nm装蒸馏水,以一个吸收池为参比,调节τ为100%,测定其余吸收池的透射比,其偏差应小于0.5%,可配成一套使用,记录其余比色皿的吸光度值作为校正值。
(2)未知物的定性分析 将未知样品配制成一定浓度的溶液,以蒸馏水为参比,于波长200~350nm范围内测定溶液吸光度,并绘制吸收曲线。根据吸收曲线的形状确定未知物,并从吸收曲线上确定最大吸收波长作为定量测定时的测量波长。
(3)标准曲线的绘制 分别准确移取一定体积的标准溶液置于所选用的容量瓶中,以蒸馏水稀释至刻度线,摇匀。根据未知样品液吸收曲线上的最大吸收波长,以蒸馏水为参比,测定吸光度,然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
(4)未知物的定量分析 确定未知液的稀释倍数,并配制待测溶液置于所选用的容量瓶中,以蒸馏水稀释至刻线,摇匀。根据未知样品液吸收曲线上最大吸收波长,以蒸馏水为参比,测定吸光度。根据待测溶液的吸光度确定未知样品的浓度。未知样品要平行测定3次。
(5)结果处理 根据未知溶液的稀释倍数,求出未知物的含量。计算公式为
c0=cx×n
式中 c0———原始未知溶液浓度(μg/mL);
cx———查出的未知溶液浓度(μg/mL);
n———未知溶液的稀释倍数。
4.数据记录与计算(www.daowen.com)
(1)比色皿配套性检验
A1=0.000 A2=
(2)定性分析
1)未知样品液的吸收曲线数据
2)用未知样品的定性的吸收曲线数据绘制吸收曲线,判断未知样品的名称并给出定性结果。未知物为:____;测量工作波长为:____。
(3)定量分析
1)标准使用溶液的配制
标准储备溶液浓度为:____;标准使用溶液浓度为:____。
2)绘制标准曲线的测定数据
根据测定得到的标准系列吸光度数据的校准值和对应的浓度绘制标准曲线。
(4)样品溶液的配制
(5)样品含量的测定
5.评分标准
紫外-可见分光光度法测定未知物的含量评分记录表
(续)
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