1.培养基制备

配制肉汤培养基45 mL，分装于250 mL三角瓶中，纱布封口，灭菌。

配制初筛平板培养基（可溶性淀粉20 g，硝酸钾1 g，磷酸氢二钾0.5 g，氯化钠0.5 g，硫酸镁0.5 g，硫酸亚铁0.01 g，琼脂20 g，水1 000 mL，pH值为7.2~7.4）350 mL，分装于500 mL三角瓶中，封口膜封口，灭菌。

2.倒平板

将融化的初筛平板培养基冷却至50~60℃，用无菌操作法倒至已灭菌的培养皿中，至盖满底部，冷却凝固待用。

3.样品预处理

取5 g土样接入45mL肉汤培养基中，30℃摇床振荡15min制成土壤悬液，此时的稀释度为10-1。另取4支试管，分别记作10-2、10-3、10-4、10-5共5个梯度，每支试管内加入9 mL无菌水。用无菌移液管从三角瓶中吸取1 mL土壤悬液，加入10-2试管中混匀，再从此试管中吸取1 mL加入10-3试管中，以此类推直至10-5试管。(www.daowen.com)

4.平板涂布分离

分别从不同稀释度的试管中吸取0.1 mL悬液，均匀涂布于初筛培养基平板上，37℃培养24~48 h。

5.菌株检测

待初筛平板长出菌落后，根据菌落不同特征挑取菌落进行保存并编号。同时，将检测试剂（Lugol碘液，5 g碘和10 g碘化钾溶于85mL蒸馏水中，碘的总浓度为150mg/mL）加入平板中，涂布均匀，菌落周围形成水解圈的菌株即是产淀粉酶的菌株，记住其编号，以便进行下一步实验。

6.保存菌株

将得到的菌株转接至斜面培养基上，30℃培养48~72 h，待菌苔长好后，4℃保存。